代春雨473000河南省南阳市第一人民医院检验科

溶血、脂血和黄疸对EV71-IgM胶体金法检测的影响

代春雨
473000河南省南阳市第一人民医院检验科

目的：探讨溶血、脂血和黄疸对EV71-IgM胶体金法检测的影响。方法：用EV71-IgM胶体金法检测不同程度溶血、脂血、黄疸EV71-IgM含量3.0 ng/mL的标本。结果：不同浓度胆红素、不同浓度甘油三酯以及血红蛋白0.2 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的标本对EV71-IgM胶体金法检测影响不明显(P＞0.05)。血红蛋白0.6 g/L和0.8 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的标本对EV71-IgM胶体金法检测影响显著(P＜0.01)。结论：重度溶血对EV71-IgM胶体金法检测的影响很大，轻度溶血、黄疸和脂血对EV71-IgM胶体金法检测的影响不明显。

溶血；脂血；黄疸；EV71-IgM胶体金法

EV71-IgM胶体金法检测简便、快速和稳定，灵敏度较高，广泛用于发热门诊和儿科门诊等[1，2]。临床实际操作过程中会出现黄疸、脂血、溶血等特殊情况，其对EV71-IgM胶体金法检测影响的研究较少。本研究旨在探讨溶血、脂血、黄疸对EV71-IgM胶体金法检测的影响，现将结果报告如下。

资料与方法

仪器与试剂：肠道病毒71-IgM (EV71-IgM)胶体金血清诊断试剂(北京万泰生物药业股份有限公司)；金标试纸条智能测定仪(型号：SC-2，福州大学科技开发总公司)；EV71-IgM全血诊断试剂(北京万泰生物药业股份有限公司)；EV71-IgM标准质控品(3.0 ng/mL)；酶标试剂(上海研盟生物技术有限公司)；高溶血EV71-IgM阴性患者血浆；高甘油三酯EV71-IgM阴性患者血清；高胆红素EV71-IgM阴性患者血清；溶血、脂血、黄疸三项指标正常的EV71-IgM阳性患者血清。

方法：以EV71-IgM标准质控品为阳性对照，用酶标法检测EV71-IgM阳性患者血清EV71-IgM含量。EV71-IgM阳性患者血清用正常人血浆稀释，使EV71-IgM含量为3.0 ng/mL和1.5 ng/mL两个样本，简称正3.0和正1.5；用EV71-IgM阳性患者血清同高总胆红素血清稀释，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，胆红素分别为100 μmol/L、200 μmol/L、400 μmol/L、800 μmol/L和1 600 μmol/ L的5个样本，分别简称为TB 100、TB 200、TB 400、TB 800和TB 1 600；用EV71-IgM阳性患者血清用高甘油三酯血清稀释，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，甘油三酯分别为4 mmol/L、8 mmol/L和16 mmol/L的3个样本，分别简称为TG4、TG8和TG16；EV71-IgM阳性患者血清用高溶血血浆稀释，使EV71-IgM含量3.0 ng/mL，血红蛋白含量分别为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L和0.8 g/L的4个样本，分别简称为Hb 0.2、Hb 0.4、Hb 0.6和Hb 0.8。分别用EV71-IgM全血诊断试剂(对照组)和EV71-IgM胶体金血清诊断试剂(试验组)按照试剂和仪器操作说明测定14个样本，每种试剂对14个样本测定20次，用金标试纸条智能测定仪读出OD值。

结果

不同浓度胆红素、不同浓度甘油三酯以及血红蛋白0.2 g/L、EV71-IgM含量3 ng/mL的标本对EV71-IgM胶体金法检测影响不明显(P＞0.05)；血红蛋白0.4 g/L、EV71-IgM 含 量 3 ng/mL的 标 本 对EV71-IgM胶体金法检测略有影响(P约等于0.05)；血红蛋白0.6 g/L和0.8 g/L、EV71-IgM 含 量 3 ng/mL的 标 本 对EV71-IgM胶体金法检测影响显著(P＜0.01)。见表1。

讨论

手足口病是一种常见的多发性传染病，以小于3岁的婴幼儿发病为主。多种肠道病毒均能引起手足口病，EV71病毒是其中最主要的一种，一般全年均可发生，5～7月为高发期。手足口病患者症状一般较轻，轻症患者出现发热、咳嗽、流涕等类似上呼吸道感染的症状，发热1～2 d后开始出现皮疹，通常出现于手足、臀部，或出现口腔疱疹。部分患儿不发热，只表现为手、足、臀部皮疹或疱疹性咽峡炎，病情较轻，患儿大多数在1周内病情缓解。重症患者病情进展十分迅速，发病1～5 d会出现精神障碍、循环障碍等，极少数患者病情危重，可致患儿死亡，存活患者可留有后遗症。手足口病目前没有专门的疫苗，也没有专门的特异性强的抗手足口病病毒药物，但早发现、早治疗完全可防可治，患儿检测血清EV71-IgM可帮助临床医生确诊手足口病，医务工作人员应非常重视手足口病的诊断。

表1 两种试剂对14个样本测定的平均OD值

本研究发现，重度溶血(血红蛋白＞0.4 g/L)对EV71-IgM胶体金法检测的影响很大，轻度溶血、黄疸和脂血对EV71-IgM胶体金法检测的影响不明显。因此检验科抽血检测血清EV71-IgM时，务必做到采血顺利和促凝管洁净等，防止标本发生重度溶血，造成假阴性结果，导致漏诊误诊，对于重度溶血标本必须重新采血。

溶血、脂血和黄疸是临床上经常出现的标本现象。大部分溶血现象可通过正确采血和正确保存标本而避免。脂血原因分为饭后采血、自身高血脂。空腹采血可避免饭后采血出现的脂血。黄疸不易改变。但脂血和黄疸对EV71-IgM胶体金法检测影响非常小。

综上所述，正确采血和正确保存标本是EV71-IgM胶体金法检测结果准确、可靠的保证。为避免漏检、减少因漏检等引发的医患纠纷，临床应注意溶血对弱阳性标本的影响，EV71-IgM的复检应采用稳定性好、特异性强、灵敏度高的定量新方法，以确保和提高检测EV71-IgM的准确性[3，4]。

[1] 王连友.HBsAg快速金标法在街头无偿献血中的应用[J].中国输血杂志,1999,12(3): 175.

[2]仇铭华,张学亮,杨一军.金标试纸血清法与全血法筛选献血者HBsAg比较[J].中国输血杂志,2001,14(4):229.

[3]魏来,陶其敏.努力规范肝脏疾病的免疫学诊断[J].中华检验医学杂志,2003,26(2): 69-71.

[4] 王小光,汪萍,陈国强,等.上海市闵行区饮食服务人员HBsAg、HBeAg检测结果分析[J].职业与健康,2005,21(5):689-690.

Effect of hemolysis,lipemia and jaundice on EV71-IgM colloidal gold detection

Dai Chunyu
Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Nanyang City,Henan Province 473000

Objective:To investigate the effect of hemolysis,lipemia and jaundice on EV71-IgM colloidal gold detection.Methods: EV71-IgM colloid gold detection was used to detect the specimen with EV71-IgM 3 ng/mL and different degrees of hemolysis, lipemia and jaundice.Results:The specimen with different degrees of bilirubin,different concentrations of three acyl glycerol and hemoglobin0.2 g/L and EV71-IgM 3 ng/mL did not have obvious effect on EV71-IgM colloidal gold detection(P＞0.05).The specimen with hemoglobin 0.6 g/L and 0.8 g/L,EV71-IgM 3 ng/mL had significant effect on EV71-IgM colloidal gold detection (P＜0.01).Conclusion:Severe hemolysis had great effect on EV71-IgM colloidal gold detection.Mild hemolysis,jaundice and lipemia had no obvious effect on EV71-IgM colloidal gold detection.

Hemolysis;Lipemia;Jaundice;EV71-IgM colloidal gold method

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.4.75