辛伽伦++++++黄冬++++++夏冬东++++++刘之荣

[摘要] 目的 探讨抑制EphA4受体活性对少突胶质前体细胞（OPC）发育的影响。 方法 将分离纯化的OPC随机分为正常组、EphA4受体抑制剂处理组（EphA4-FC组）。EphA4-FC组加入250 nmol/L EphA4-FC，培养至第2天。免疫细胞化学染色法观察正常组OPC特异性标志物NG2与EphA4受体的共表达情况；通过细胞计数观察两组OPC数量变化情况；通过Western blot检测两组细胞蛋白样品中OPC特异性蛋白血小板源性生长因子α受体（PDGFαR）的表达变化情况。 结果 免疫细胞化学染色显示，正常体外培养OPC高表达EphA4受体；与正常组比较，EphA4-FC组的NG2+阳性细胞数量明显增多（P < 0.05）。Western blot显示，与正常组比较，EphA4-FC组细胞蛋白中PDGFαR的表达显著增高（P < 0.05）。 结论 培养的OPC上高表达EphA4受体，通过抑制EphA4受体可以促进OPC的增殖。

[关键词] EphA4受体；少突胶质前体细胞；慢性脑缺血；脑白质损伤

[中图分类号] R743.3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）02（b）-0013-04

[Abstract] Objective To investigate the effect of inhibit EphA4 receptor on oligodendrocyte progenitor cell （OPC）. Methods The purified OPC was randomly divided into normal group and EphA4-FC group （250 nmol/L， 2 d）. Immunofluorescence staining was used to observe the co-expression of NG2 （a marker for OPC） and EphA4 receptor. Cell counting was used to observe the change of OPC. Western blot was used to examine the expression of platelet-derived growth factor α receptor （PDGFαR， a marker for OPC） in two groups. Results Immunofluorescence staining showed that the high expression of EphA4 receptor on OPCs in vitro， and compared with normal group， more NG2+ cells were observed in the EphA4-FC group （P < 0.05）. Western blot showed that PDGFαR expression was significantly increased， compared with normal group （P < 0.05）. Conclusion EphA4 receptor is express highly on OPC in vitro， and inhibition of EphA4 receptor can promote OPC proliferation.

[Key words] EphA4 receptor； Oligodendrocyte progenitor cell； Chronic cerebral ischemia； White matter lesion

隨着人口老龄化进程发展，超过一半的老年人有不同程度的脑白质损伤（WML）[1]，慢性脑灌注不足是导致WML的主要原因[2-3]。脑白质的组成成分少突胶质细胞（OLs）、轴突和髓鞘对缺血高度易损，OLs的死亡丢失、轴突的变性坏死及髓鞘的脱失是WML的主要病理改变[4]。OLs来源于脑白质原位的OPC以及室管膜下区的多潜能神经干细胞[5-6]，脑白质脱髓鞘损伤后，损伤原位的OPC可通过增殖分化补充死亡丢失的OLs[7]。研究表明，Eph-Ephrin信号通路可影响OLs系的发育，如脊髓损伤后OPC和OLs上均有Eph受体表达[8]；OPC与轴突间可通过Eph-Ephrin相互作用进行迁移[9]；阻滞EphA4可促进小鼠脊髓损伤后轴突再生[10]；阻滞EphA4信号通路，可改善阿尔兹海默病小鼠模型中海马的突触功能障碍[11]。本课题组前期研究发现WML过程中存在OLs系的减少，同时伴随EphA4表达变化，两者呈负相关[12]。……