黎先伟 译 By D.M.Madson et al

猪圆环病毒2型疫苗对母猪繁殖性能及其胎儿感染的影响

黎先伟 译 By D.M.Madson et al

一、研究背景

猪圆环病毒2型（PCV2）为圆环病毒科圆环病毒属成员，由Tischer于1974年首先在PK-15细胞中发现。该病毒粒子含有单股负链环状DNA，相对分子量5.8×102，无囊膜，不具有血凝活性，基因组全长大约为1.7kb。PCV2有3个公认的基因型，分别是PCV2a、PCV2b和PCV2c。猪圆环病毒感染的临床表现多种多样，包括肺炎、腹泻、消瘦和母猪繁殖障碍。猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）主要用来描述与PCV2感染有关的多系统的临床疾病。

加拿大首次报道在健康状况良好的猪群中检测到PCV2，随后发现它与成年动物的繁殖疾病有关。PCV2相关的繁殖障碍第一次在加拿大报道。临床上，这种疾病的主要特征是流产、仔猪存活率下降、死胎及木乃伊胎增多。PCV2引起胎儿感染的大体病变包括扩张性心肌炎、肺水肿、肝肿大和腹水。大多数胎儿感染PCV2的显微病变主要由心肌衰弱、坏死、纤维素性、坏死性心肌炎。这些病变是由于PCV2对胎儿的心室肌细胞有趋向性。但这种趋向性在怀孕末期有所下降，反而淋巴组织PCV2的分子检测量有所增加。另外，研究发现PCV2具有透过胎盘的能力，引起胎儿感染PCV2。有研究证明，分娩前3周感染PCV2病原会引起母猪嗜睡、流产以及出现死胎（早在感染后7天的时候）。

2004至2005年期间，PCVD在北美洲的育肥猪中迅速蔓延，导致以高发病率、高死亡率以及生长率减慢为特征的疾病大流行。在此次大流行中，PCV2病毒株的分子特性被鉴定为PCV2b基因型，这种基因型以前在北美洲并没有报道过。从那以后，许多圆环病毒疫苗开始用于疾病的预防。本文研究的主要目的是母猪接种圆环病毒2型（PCV2）疫苗对预防胎儿PCV2感染以及繁殖率下降的效果。

二、试验方法和结果

12头SPF（不含PCV2）怀孕母猪随机的分成4组。第1组为阴性空白对照组；第2组对怀孕28天的母猪接种PCV2疫苗（市面上可买到）；第3组对怀孕28天的母猪接种PCV2疫苗，并在怀孕56天时口鼻滴入PCV2b亚型病毒；第4组对怀孕56天的母猪口鼻滴入PCV2b亚型病毒，不接种PCV2疫苗。在母猪怀孕期间，每周收集一次全部母猪的血清样品，让母猪自然分娩。分娩时，收集母猪初乳样品、喂乳前血清样品以及初生小猪身上的组织样品，进行血清学、PCR、组织显微镜检查以及免疫组化等分析。

在本次研究条件下，没有发现母猪出现繁殖障碍。第2和3组母猪血清中可以检测到PCV2特异免疫球蛋白G和血清中和抗体，这可有效预防强毒攻击所引起母猪病毒血症。在第3组母猪的初乳样品、胎儿以及初生小猪中，可以检测到PCV2的DNA分子，但没有发现组织病变和PCV2特异性抗原。

本研究的结果显示PCV2的垂直传播同样存在于免疫后的母猪。

三、讨论

母猪PCV2相关病毒血症最有可能是胎儿感染的缘由，尽管有研究显示精液传播也是一种可能的途径。已有研究表明母猪怀孕末期鼻内接种PCV2后，病毒可以通过胎盘屏障。在本研究中，第4组母猪（未接种疫苗）鼻内接种PCV2引起母猪出现病毒血症，初乳样品中检测到PCV2的DNA分子以及抗PCV2抗体。母猪PCV2病毒血症导致子宫内的胎儿经胎盘受感染，使PCV2存在垂直传播的可能。与其他试验和实地观察相比，在本试验条件下，并没有观测到PCV2相关繁殖障碍、流产、母猪疾病以弱仔数增加等症状。这可能由于不同的实验接种的PCV2毒株的剂量有所不同。不过，我们的调查结果发现实际养殖场中，PCV2垂直传播的发生率要比报道的数据高。

近年来，许多PCV2疫苗在对抗PCVAD方面有确实的效果。当前，3种疫苗批准使用在3至4周龄的仔猪上，另一种疫苗则标明可以在分娩前母猪上使用。一个关于PCV疫苗的研究中，结果显示72头接种疫苗的育肥猪，可有效预防PCV2病毒血症，减少排泄物和口腔分泌物的病毒DNA的含量。在另一项研究中发现，疫苗可诱发中和抗体的产生，降低病毒血症的发病率，排泄物中病毒的含量以及PCV2相关的显微病变。在现场试验期间，接种PCV2疫苗与未接种疫苗的猪都能观察到相似的结果。

迄今为止，只有一种PCV2的疫苗在繁殖动物进行过实验研究。已有数据显示母猪疫苗接种后能减少母猪分娩时死胎的数量，降低断奶仔猪的死亡率及母猪的死亡率，提高母猪的产仔率。实际生产中，接种疫苗已证实可以很好的减轻PCV2相关繁殖障碍和改善母猪的性能。然而，据作者所了解，母猪接种PCV2疫苗后对于子宫内胎儿PCV2复制的影响目前还没有相关的研究。

对于检测怀孕母猪接种PCV2疫苗后免疫应答差异以及怀孕期间子宫内免疫调节差异的研究已有所报道。在本次研究中，对怀孕28天的母猪接种PCV2疫苗后并没有观察到相关的副作用。然而，对怀孕56天的母猪攻入PCV2病毒后，疫苗并不能防止初乳中含有PCV2的DNA分子；胎儿出现PCV2病毒血症，或者小猪体内含有抗PCV2 IgG抗体。考虑血清收集的时间（每周一次）和PCR鉴定的灵敏性，可能是第3组猪PCV2病毒血症检出率有限的原因。有趣的是，其中第3组所产的小猪出生时带有病毒血症或能检测到PCV2抗体，但在组织中（心肌、肺、扁桃体或耳廓）并没有检测到PCV2抗原。这意味着要么在怀孕期胎儿感染比第4组的时间出现的更晚，要么母猪接种疫苗后减少胎儿PCV2的复制。

虽然在本研究中PCV2疫苗并不能预防胎儿感染病毒，但有第3组所产的小猪在胎儿期就产生特异性抗体，并没有出现喂乳前病毒血症、相关显微病变以及检测不到PCV2抗原。这意味着在分娩前，具有免疫活性的胎儿（怀孕期超过70天）能够清除PCV2的感染，使得没有检测到相关显微病变或PCV2抗原。这个结果在之前并没有报道，与猪细小病毒感染胎儿的病例十分相似。

总之，怀孕母猪单纯感染PCV2病原并不一定出现繁殖障碍，但与胎儿的感染有一定的联系。PCV2疫苗可以使怀孕母猪产生中和抗体和抗PCV2抗体，但是不能阻止垂直传播。同时，母猪接种疫苗也不能防止其初乳中的PCV2，这也是垂直传播的另一种途径。此外，在分娩前子宫内具有免疫活性的胎儿能够清除PCV2的感染。