闫海霞+蒋月喜+何荆洲

摘要：为研究蝴蝶兰增殖培养的影响因子，优化蝴蝶兰的增殖培养基，从品种、丛植芽、接种量、顶端优势4个因子进行研究分析。结果表明：4个品种对增殖培养的影响不具有选择性；丛植芽（株/丛）数为2、3、4时，有利于蝴蝶兰的增殖培养；在一定容积的容器中，不同品種的接种密度不同，V31适宜的接种密度为2丛，每丛2株或4株；火凤凰适宜接种密度为2丛，每丛4株；钜宝红玫瑰和闪电的适宜接种密度为4丛，每丛为3株。以茎段为接种部位，较有利于蝴蝶兰的增殖培养。

关键词：蝴蝶兰；群聚效应；增殖；接种密度

中图分类号： S682.2+90.4 文献标志码： A

文章编号：1002-1302（2016）11-0216-03

蝴蝶兰（Phalaenopsis spp.）属兰科蝴蝶兰属，原产于菲律宾、印尼以及我国台湾等地，有“兰花皇后”的美誉[1]。近年来，蝴蝶兰作为中高档花卉在年宵花市场上占据了主导地位，市场需求大。蝴蝶兰可采用分株繁殖，但繁殖系数低、速度慢，无法满足商品化生产的要求，而利用组培快繁技术则可在短时间内获得大量的优质种苗，也避免了变异植株的产生。组培快繁作为蝴蝶兰工厂化生产的最有效手段，影响因子很多，其中培养物的接种量就与其器官分化和生长有着密切的关系。接种量过多，会导致生物体无法充分吸收到所需的营养成分；但接种量过少，浪费资源和空间，不符合工厂化生产的要求[2]。因此，适宜的接种量是组培快繁中调节器官形成和生长的重要因素之一，接种密度过大过小对细胞的生长都不利。相关研究在马铃薯[3]、卡特兰[4]、三七[5]、人参[6]等植物中有过报道。蝴蝶兰组织培养的研究虽然很多，尤其是培养基的激素组合以及浓度选择上[7-10]，但是关于接种密度对增殖培养的影响研究极少。仅有于亚军等进行了相关研究，其结果表明：适当加大接种密度（20～25个原球茎/75 cm2培养基质面积），有利于提高增殖效率[11]。实际上，在养花实践中，兰花具有喜群居恶独居的特性，这种群居性的生物学特性，在同一个培养空间内能够促进彼此的生长发育，我们称这种群居的特性为群聚效应。关于蝴蝶兰群聚效应研究极少，本研究主要研究品种以及接种密度对蝴蝶兰增殖培养的影响，筛选出有利于提高蝴蝶兰增殖系数的接种密度，为蝴蝶兰工厂化生产提供技术支持和参考。

1 材料与方法

1.1 材料

供试蝴蝶兰品种为闪电、钜宝红玫瑰、V31、火凤凰，取其无菌苗为试验材料。

1.2 方法

1.2.1 品种对增殖培养的影响 以不同品种的蝴蝶兰组培苗，在240 mL的组培瓶（高度×直径×口径=90 mm×68 mm×62 mm）中接种10个单株茎段，每个处理重复10次。培养45 d后，观察并分析品种对增殖培养的影响。

1.2.2 群聚效应对增殖培养的影响

1.2.2.1 丛植芽对蝴蝶兰增殖影响 将蝴蝶兰芽分为1、2、3、4株/丛，在240 mL的组培瓶中接种1丛，每个处理重复10次。培养45 d后，观察并分析丛植芽数量对增殖培养的影响。

1.2.2.2 接种量对蝴蝶兰增殖培养的影响 将蝴蝶兰芽分为2、3、4株/丛，在240 mL的组培瓶中接种2、3、4丛，每个处理重复10次。培养45 d后，观察并分析不同接种量对增殖培养的影响。

1.2.3 接种部位对蝴蝶兰增殖培养的影响 将闪电、钜宝红玫瑰、V31、火凤凰的无菌苗，分别选取2种部位：茎段和茎尖，分别接种在240 mL的组培瓶中，每瓶接种3丛，丛植芽数为5株/丛，每个处理重复10次。培养45 d后，观察并分析茎段和茎尖对增殖培养的影响。

1.3 统计分析

试验数据用SPSS 19.0软件进行差异显著性测验，并采用Duncans 多重比较。

2 结果与分析

2.1 品种对增殖培养的影响

通过表1分析可知，就增殖率而言，4个品种中，V31、火凤凰、闪电之间增殖率无显著差异，仅钜宝红玫瑰增殖率有显著差异，钜宝红玫瑰的增殖率最低，仅有40%。对于增殖系数来说，4个品种间无显著差异。这表明，不同品种的增殖率是有差异显著，V31、火凤凰、闪电3个品种无显著差异，与钜宝红玫瑰有显著差异，但是这种差异并不影响蝴蝶兰的增殖培养，可见不同品种对蝴蝶兰的增殖培养不具有选择性。

2.2 群聚效应对增殖培养的影响

2.2.1 丛植芽对蝴蝶兰增殖培养的影响 由表2可见，不同品种的丛植芽数量对蝴蝶兰的增殖系数影响略有差异。当丛植芽为1、2、3、4株/丛时，4个品种的增殖系数的之间无显著差异。但方差分析表明，当接种的丛植芽数量为1株/丛时，显著低于丛植芽为2、3、4株/丛时4个品种的增殖系数，此时增殖系数极低，不利于增殖的目的；虽然当接种的丛植芽数量为2、3、4株/丛时，3种处理之间无显著差异，但增殖系数明显提高，这是符合组培快繁目的的。综上分析可知，当丛植芽数量为2、3、4株/丛时，有利于4种蝴蝶兰的增殖培养。

2.2.2 接种量对蝴蝶兰增殖培养的影响 不同的接种密度处理对V31增殖培养的影响结果（表3）表明：9个处理增殖率不存在显著差异，但对增殖系数的影响略有差异。其中，处理1、2、3和处理7、9之间存在显著差异，但处理7、9的增殖系数大于处理1、2、3的增殖系数，这表明处理7和9对V31的增殖培养更有利。由此可知，V31采用接种量为2丛，每丛丛植芽数为2、4株/丛对其增殖培养有较好的效果。

不同接种密度处理对火凤凰增殖培养的影响结果（表4）表明：9个处理增殖率不存在显著差异，但对增殖系数的影响略有差异。其中，处理1和处理9之间存在显著差异，但处理9的增殖系数大于处理1的增殖系数，这表明处理9对火凤凰的增殖培养更有利。由此可知火凤凰采用接种量为2丛，每丛丛植芽数为4株对其增殖培养有较好的效果。

不同的接种密度处理对钜宝红玫瑰增殖培养的影响结果（表5）表明：9个处理增殖率不存在显著差异，但对增殖系数的影响略有差异。其中，处理2和处理4、5、7、8之间存在显著差异，但处理2的增殖系数大于其余4个处理的增殖系数，这表明处理2对钜宝红玫瑰的增殖培养更有利。由此可知钜宝红玫瑰采用接种量为4丛，每丛丛植芽数为3株对其增殖培养有较好的效果。

不同的接种密度处理对闪电增殖培养的影响结果（表6）表明：9个处理增殖率不存在显著差异，但对增殖系数的影响略有差异。其中，处理2和处理1、4、7、8之间存在差异显著，但处理2的增殖系数大于其余4个处理的增殖系数，这表明处理2对闪电的增殖培养更有利。由此可知闪电采用接种量为4丛，每丛丛植芽数为3株对其增殖培养有较好的效果。

2.3 接种部位对蝴蝶兰增殖培养的影响

由表7可知，茎段和茎尖对发生增殖数、增殖率、增殖数、增殖系数的影响差异显著，而品种对发生增殖数、增殖率、增殖数、增殖系数的影响无显著差异。这表明，蝴蝶兰的增殖培养不因品种不同而产生差异，但是不同的接种部位对蝴蝶兰的增殖培养有不同的影响，当以接种茎段为主时，发生增殖数、增殖率、增殖数、增殖系数都处于一个较高的数值水平，其中增殖率最高为100%，最高增殖系数是4.53；而当以接种茎尖为主时，发生增殖数、增殖率、增殖数、增殖系数都处于一个较低的数值水平，其中增殖率最高为60%，最高增殖系数是1.47。由此可见，以茎段为接种部位，较有利于蝴蝶兰的增殖培养。

3 讨论与结论

3.1 群聚效应对蝴蝶兰增殖培养的影响

在兰花的栽培上，通常是将3株以上的兰花种植在一起，这样有利于兰花的生长，这是兰花的群居性。蝴蝶兰的商品化栽培虽然采用单株栽培的方式，但蝴蝶兰也是具有群居性的，尤其是蝴蝶兰的增殖培养中，这种群聚的作用较明显。通过研究发现：当丛植芽数量为1株/丛时，其增殖系数显著低于丛植芽数量为2、3、4株/丛时。可见，接种的丛植芽数量对增殖有显著影响，单株为1丛接种时，增殖系数低，丛植芽为2、3、4株为1丛时，能显著提高其增殖系数，有利于增殖培养。这和崔秋华等的研究结果[12]相一致。在蝴蝶兰的组织培养过程中，新芽的形成与发育受多种因素的影响，其中接种密度是影响因子之一。依据植物种类（品种）、培养容器容积本试验4个品种的适宜接种密度分别为：在240 mL的组培瓶中，V31采用接种量为2丛，每丛丛植芽数为2、4株；火凤凰的接种量为2丛，每丛丛植芽数为4株；钜宝红玫瑰接种量为4丛，每丛丛植芽数为3株；闪电接种量为4丛，每丛丛植芽数为3株。此外还受培养方式的不同而不同，李旭等以浸没培养的方式，研究了10、20、30 g这3种接种量对大花蕙兰原球茎增殖生长的影响，结果表明，大花蕙兰原球茎在接种量为20 g时，增殖系数最大，增殖较快，生长最好[2]。

3.2 接种部位对蝴蝶兰增殖培养的影响

本试验选取茎尖和茎段2个接种部位来研究其对增殖培养的影响，是基于顶端优势的理论进行的。顶端优势指顶芽优先生长，抑制侧芽发育的现象。本研究得出：茎段为接种部位，较有利于蝴蝶兰的增殖培养。主要原因：茎段相当于是破除顶端优势的植株，而茎尖则为保留顶端优势的植株，茎尖自身具有抑制侧芽生长的特性，因此蝴蝶兰采用茎尖进行增殖培养的效果不如茎段。

综上所述，4个品种对增殖培养的影响不具有选择性；丛植芽数为2、3、4株/丛时，有利于蝴蝶兰的增殖培养；在一定容积的容器中，不同品种的接种密度不同，V31适宜的接种密度为2丛，每丛2株或4株；火凤凰适宜的接种密度为2丛，每丛4株；钜宝红玫瑰和闪电适宜的接种密度为4丛，每丛为3株。以茎段为接种部位，较有利于蝴蝶兰的增殖培养。

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