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qRT-PCR检测结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统mazE F的表达

2017-03-16赵继利屈艳琳谢婉莹

中国人兽共患病学报 2017年2期
关键词:耐药

刘 微,赵继利,屈艳琳,谢婉莹,袁 俐

qRT-PCR检测结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统mazE F的表达

刘 微,赵继利,屈艳琳,谢婉莹,袁 俐

目的 探讨结核分枝杆菌毒素基因mazF3,6,9及抗毒素基因mazE3,6,9的表达差异。方法 运用实时定量PCR检测结核分枝杆菌单耐药株20株,耐多药株20株和标准株H37Rv毒素基因mazF3,6,9及抗毒素基因mazE3,6,9的表达水平;组间基因表达水平的差异用one-way ANOVA进行统计分析。结果 与对照株相比较,毒素基因mazF6,9在单耐药组(11.151 9±22.317 21;8.430 6±17.978 97)及耐多药组(4.601 6±1.290 18;6.962 7±6.929 48)表达均上调且差异有统计学意义(P<0.01),mazF3基因在单耐药组及耐多药组差异无统计学意义(P>0.05),抗毒素基因mazE3在单耐药(0.360 6±0.125 27)及耐多药组(0.201 6±0.165 42)中表达均下调,差异有统计学意义(P<0.01),mazE6均无统计学意义,mazE9只有在耐多药组(0.398 9±0.376 79)中表达下调,差异有统计学意义,(P<0.01)。结论 毒素基因mazF6,9抗毒素基因mazE3,9可能参与了结核分枝杆菌的耐药形成,具体机制尚待进一步的研究。

结核分枝杆菌;毒素-抗毒素系统;耐药性;耐多药

毒素-抗毒素系统(toxin-antitoxin systems, TAS)最早发现于低拷贝的质粒中,随后的研究发现在某些细菌如结核分枝杆菌的染色体上也存在TA系统[1]。TA系统是由两个相互重叠的基因组成的一个操纵子,其中一个编码TA毒素蛋白,另一个编码抗毒素[2-3]。毒素蛋白以不同的方式影响细胞功能,如DNA复制,蛋白质合成,细胞分裂,肽聚糖生物合成以及核糖体组装等,其中RNA裂解是常见的方式[4-7]。根据抗毒素的作用方式及化学本质TA家族可分成5型[8]。mazEF是II型系统,其中mazE编码不稳定的抗毒素MazE,mazF编码稳定的毒素蛋白MazF,MazF为一种核糖核酸内切酶能切割单链mRNA,MazF切割mRNA具有ACA特异性[9-12]。毒素-抗毒素系统(TAS)能够感应不同的环境条件如氨基酸缺乏,氧化应激,缺氧,被巨噬细胞吞噬及在宿主组织中[13-17]。

结核病(tuberculosis, TB)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis, MTB)引起的一种慢性传染病。随着结核分枝杆菌耐药率的增高,结核病的感染率及死亡率日益增高。……

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