焦芳艳，吕岳峰，尹铁球，杨丽华

(湖南省第二人民医院，1、临床检验中心；2、检验科，湖南长沙410007)

微柱法结合盐水试管法检测ABO血型弱抗体

焦芳艳1，吕岳峰1，尹铁球2，杨丽华1

(湖南省第二人民医院，1、临床检验中心；2、检验科，湖南长沙410007)

目的探讨微柱法结合盐水凝集试管法在鉴定ABO中血型弱抗体的有效性。方法按照《临床实验室室间质评要求》（GB/20032301－T－361）统计全省室间质评201405批号的结果；现场采用微柱凝胶免疫卡法、盐水试管法及盐水试管4℃冰箱15min的方法检测201405批号的质评标本。结果2014年ABO血型质评标本201405号，全省质评统计结果为试管法检出率41.2%、微柱凝胶法检出率36.2%；现场检测结果为微柱法检出率36.8%、盐水试管法检出率60%和盐水试管法4℃15min检出率95%。结论检测ABO血型弱抗体采用微柱凝胶法结合盐水试管法尤其盐水试管放入4°C冰箱15min的方法是一种简单易行的方法。

ABO血型；弱抗体；试管法；微柱凝胶卡法

ABO血型正确鉴定是临床安全输血的关键，在临床及血站鉴定血型过程中，弱抗原抗体是导致ABO血型鉴定结果出现正反定型不符或错误一个重要原因。据有关报道自身存在抗原抗体减弱情况约占临床疑难血型35%以上[1]，临床多资料[2－6]显示抗体减弱多常见。目前，微柱凝胶免疫卡广泛应用于临床，而且据笔者了解到，普遍认为这种方法可以代替盐水法。然而，据多资料[1，2，7－9]显示检测ABO弱抗原抗体微柱法有一定的局限性，用微柱凝胶法结合盐水试管法结果更准确。笔者通过我省质评资料和现场检测用这两种方法对ABO血型弱抗体进行比较分析如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源201405标本由北京金豪制药有限股份公司提供，B型血浆（＞30秒）抗A(2+)，抗B（－）。

1.2 现场检测试剂微柱凝胶法均为长春博讯公司，试管法红细胞悬液厂家为上海血液生物医药有限公司（除实验室5外）。

1.3 方法数据统计按照《临床实验室室间质评要求》（GB/20032301－T－361）标准。现场检测采用微柱凝胶免疫卡法、盐水试管法及盐水试管4℃冰箱15min的方法检测201405号质评标本。

1.4 统计学方法采用SPSS 18.0软件及科临易检统计软件进行统计学分析，计数资料采用百分比表示，不同方法间检出率的比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2014年全省实验室对弱抗体标本血型鉴定准确率情况2014年第一次血型质评，其中201405批号标本采用了抗A弱凝集抗体（B型血浆），来初步了解全省对弱抗体血型鉴定的情况。通过统计，结果见表1。

表1 全省实验室对弱抗体血型鉴定准确率统计

从表1看出，此批号标本全省实验室的符合率36.7%，误判成AB型占63%。

2.2 血型鉴定方法结果统计全省实验室采用试管法和微柱法两种方法的检测数据见表2。

表2 全省实验室血型鉴定不同的方法结果统计

结果显示，微柱凝胶卡结果符合率36.2%、盐水试管法结果符合率41.2%，后者稍高于前者。

2.3 20家医院对同一标本现场检测鉴于以上情况，本室采用质评标本201405号在20家医院实验室进行了现场检测，现场检测按全国操作规程[10]和产品说明书要求操作，检测结果见表3。

表3 同一批次标本20家医院现场检测结果数据统计

结果显示，微柱法结果检出率：36.8%，盐水试管法检出率60%，盐水试管法放入4°C冰箱检出率95%.采用SPSS 18.0软件进行统计学分析，结果表明盐水试管法（反定型）4°C冰箱15min测定准确率显著高于其它两种方法(χ2=14.632，P=0.001)，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

从表2显示微柱凝胶卡法（36.2%）稍低于盐水试管法（41.2%）。从表3现场检测结果来看：盐水试管法放入4°C冰箱符合率高达95%，而且凝集明显强于微柱凝胶卡法和盐水试管法（常规实验室温度），证实用盐水试管法尤其盐水试管法放入4°C冰箱的方法比微柱卡法检测弱抗体更有效。其与多个文献资料[2，7－9]相一致。

本统计数据表明，微柱凝胶技术对弱ABO抗体反应凝集减弱或检测不出来，而用盐水法及盐水法放入4°C 15min后结果检出率高，其原因可能为，首先是全省各实验室、仪器、试剂、操作人员及态度等差别，其次可能因为红细胞抗原与相应抗体反应是一种可逆的过程，这种反应取决于抗原抗体的结合强度，当红细胞抗原抗体结合强度弱，在微柱凝胶卡技术试验过程中，离心产生的切应力超过亲合力，抗体依赖的红细胞凝集就被分开，从而出现假阴性结果[11，12]。然而盐水试管法，红细胞抗原抗体发生反应后，由于没有受到微柱凝胶卡技术中切应力和红细胞非正常负电荷间的排斥力的影响，红细胞抗原抗体结合后，相对比较稳定[8]。而且微柱凝胶血型卡，由于微柱凝胶孔体积小，加样量小，反应时间短(立即离心)，当血型抗原或抗体水平减低时，也会造成不凝集的假阴性结果[5]。试管法可以在不同温度放置在不同时间，反复离心，这样能避免凝胶血型卡离心后无法再用的缺点[5]。

盐水试管法放入4℃冰箱15min后凝聚会加强，其原因为ABO血型抗体为IgM类抗体，在4℃时反应较强[13]，正反定型试验时，可以通过增加反应时间或在4℃下放置5～10min后再离心观察结果[14]，可得到更为准确的血型结果。

在现场检测盐水试管法4℃冰箱15min中有一家实验室得出AB型的错误结果，因实验室自配试剂所取红细胞悬液只随机采取两人健康成人血液，且配置时间已过七天，说明血型鉴定试剂的质量也是确保实验正确的重要因素。

正确的ABO血型鉴定是临床输血安全的重要保障，在我们平常鉴定血型的工作中应该端正态度，养成认真仔细的工作习惯，碰到ABO疑难血型最好多种方法验证。

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R193.3，R457.1+1

A

1674－1129(2017)01－0124－02

10.3969/j.issn.1674－1129.2017.01.043

2016－08－11；

2016－11－25)