利用表达谱芯片数据筛选不同表达丰度的内参基因
2017-03-13胡世贤陆佳涛徐福意晁天柱周梁良李凯周宇荀肖君华
胡世贤,陆佳涛,徐福意,晁天柱,周梁良,李凯,周宇荀,肖君华
(东华大学生物科学与技术研究所,上海 201620)
利用表达谱芯片数据筛选不同表达丰度的内参基因
胡世贤,陆佳涛,徐福意,晁天柱,周梁良,李凯,周宇荀,肖君华*
(东华大学生物科学与技术研究所,上海 201620)
目的 基于表达谱芯片的检测结果,筛选多个内参基因,用于小家鼠肝脏组织中具有不同表达丰度基因的定量检测。方法 应用表达谱芯片技术,完成小鼠肝脏组织的表达谱检测;依据基因表达丰度将基因分为3组,并进一步通过变异系数(coefficient of variation, CV)组内筛选候选内参基因;采用实时荧光定量PCR技术(real-time quantitative polymerase chain reaction, qPCR)和geNorm软件确定内参基因。结果 表达谱芯片成功采集超过60000个小鼠肝脏组织中转录本的表达量数据,并将之分为低、中、高3个组合。最终筛选了低表达Casp2和Lrrc14、中表达Nrd1和Trpc4ap、高表达Atp5a1和Clu,共6个内参基因。结论 基于表达谱芯片数据筛选的6个内参基因,可适用于qPCR技术准确定量小家鼠肝组织转录组中不同表达丰度基因的表达量。
内参基因;表达谱芯片;实时荧光定量PCR;geNorm软件
血脂水平异常是动脉粥样硬化、心脏病和脂肪肝密切相关的重要危险因素[1]。随着系统遗传学的蓬勃发展,研究者们利用高血脂小鼠模型,结合基因组学、转录组学、表型组学等知识,在血脂相关遗传学研究中取得了丰硕的成果[2]。其中,基因表达分析在转录组水平上,是研究血脂等复杂性状不可或缺的方法[3]。常用的技术如基因表达谱芯片,操作方便,通量高,可准确快速得到完整的全基因组表达丰度数据,但是昂贵的价格限制了其应用。……
