徐元宏

临床微生物检验技术若干进展

徐元宏

临床微生物 检验技术 进展

临床微生物学是研究微生物的形态、结构、分类、生命活动规律的一门科学，包括细菌学、病毒学、真菌学等。新现与再现传染病的爆发促进临床微生物检验的发展，分子生物学技术日新月异丰富了临床微生物检验技术的内涵，现就近年临床微生物检验技术的进展作一综述。

1 临床微生物病原体的快速诊断

虽然对“快速”的时间长短没有正式的定义，但是大多数人期望快速的系统能在4 h内提供可用的结果。微生物的繁殖时间是30 min或更长时间，不允许那些依赖微生物生长与否的检测方法。为了克服这一问题，必然使用全新的底物，检测待测菌产生的酶或蛋白质，从而在1～4 h内检测出应答反应。

1.1 细菌与真菌的快速诊断 经典临床微生物尤其细菌、真菌鉴定是根据培养基中的反应和物理特性的观察，如菌落形态和气味，再加上革兰染色、生化反应、凝集试验。常规使用的鉴定方法趋于微型化和便捷化。生化反应是依据每种生物对于系统中每种底物的反应来确定的，包括接种物制备、接种浓度、孵育条件和结果解释。大多数系统依赖于一个或几个指标的组合，包括：①底物利用后产生的pH值变化（API、Crystal、Vitek、MicroScan传统板、Phoenix板，Sensititre板）；②酶促反应释放显色或荧光化合物（Crystal，Vitek，MicroScan快速试剂，Phoenix，Sensititre）；③在各种碳源的存在时，四氮唑指示剂的代谢活性（Biolog）；④挥发性或非挥发化合物的检测（MIDI）；⑤可见生长的识别（API 20C AUX）。

MALDI-TOF MS比较的是菌株蛋白质指纹图谱，提供了快速且廉价的细菌和真菌鉴定方法[1]。……