赵宝磊，刘运超，陈玉梅，姬鹏超，王聚财，刘 畅，杨素珍，张改平,*

(1.河南农业大学 牧医工程学院，河南 郑州 450002；2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002)

O型口蹄疫病毒VP0和VP1蛋白的可溶性表达与反应原性分析

赵宝磊1，刘运超2，陈玉梅2，姬鹏超2，王聚财1，刘 畅2，杨素珍2，张改平1,2*

(1.河南农业大学 牧医工程学院，河南 郑州 450002；2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002)

为了高效可溶性表达O型口蹄疫病毒(FMDV)VP0、VP1结构蛋白，根据大肠杆菌密码子的偏爱性优化合成VP0和VP1基因片段，并将其克隆到pE-SUMO载体中，构建重组质粒SUMO-VP0和SUMO-VP1，将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达，并优化诱导温度、时间和IPTG浓度等表达条件。结果显示， SUMO-VP0可溶性蛋白表达的最佳条件为：20 ℃条件下，0.1 mmol/L IPTG诱导表达8 h；SUMO-VP1可溶性蛋白表达的最佳条件为：37 ℃条件下，0.1 mmol/L IPTG诱导表达12 h。 SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明，表达的SUMO-VP0、SUMO-VP1可溶性蛋白能够被抗FMDV的阳性血清识别，具有很好的反应原性。

口蹄疫病毒； VP0、VP1结构蛋白； 可溶性表达； SUMO标签

口蹄疫病(foot and mouth disease,FMD)是一种急性、热性、高度接触性传染病，由口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)引起，主要感染牛、猪、羊等多种偶蹄动物[1]。血清学试验和交叉保护性试验研究发现，FMDV主要存在7个血清型：A型、C型、O型、亚洲Ⅰ型、南非Ⅰ型、南非Ⅱ型、南非Ⅲ型。这7个血清型之间没有交叉保护，且遗传变异频率非常高，流行范围非常广泛，给世界上许多国家的畜牧业生产造成了巨大的经济损失[2]。目前，免疫接种疫苗是防控该病的主要措施，接种的主要疫苗是弱毒苗和灭活苗，虽然这些疫苗具有很好的保护效果，但是制备成本高，还存在灭活不完全导致病毒暴发流行的危险。……