亚麻类萌发素蛋白基因LuGLP1-13的克隆及表达分析
2017-02-24于莹袁红梅程莉莉赵东升陈晶吴建忠张树权吴广文
于莹,袁红梅,程莉莉,赵东升,陈晶,吴建忠,张树权,吴广文
(黑龙江省农业科学院经济作物研究所,哈尔滨,150086)
亚麻类萌发素蛋白基因LuGLP1-13的克隆及表达分析
于莹,袁红梅,程莉莉,赵东升,陈晶,吴建忠,张树权,吴广文*
(黑龙江省农业科学院经济作物研究所,哈尔滨,150086)
类萌发素蛋白(Germin-like proteins,GLPs)是一类防御应答蛋白,在植物抗病过程中发挥重要作用。前期研究工作发现一个类萌发素蛋白基因(Lus10003267)在亚麻盐碱胁迫下数字基因表达谱(DGE)数据中显著上调,推测该基因可能与亚麻盐碱应答胁迫有关。本研究利用亚麻Lus10003267基因序列和RT-PCR方法克隆了亚麻类萌发素蛋白基因,命名为LuGLP1-13,其CDS长687bp,编码228个氨基酸。生物信息学分析表明,该蛋白质分子量为24.3ku,等电点为5. 77,不稳定系数为23.64,是一种较稳定的酸性蛋白。该蛋白具有信号肽序列,是一种胞外分泌蛋白。多序列比对及进化分析表明,该蛋白具有典型的GLPs家族特征,与蓖麻、毛果杨及胡杨的GLPs家族蛋白亲缘关系相对最近。荧光定量PCR结果表明,亚麻LuGLP1-13基因在盐碱胁迫下被显著诱导表达(尤其在碱性盐胁迫下),推测该基因可能参与亚麻应答盐碱胁迫的过程,这一结果为进一步研究亚麻LuGLP1-13基因的功能和耐盐碱分子机制提供了理论依据。
亚麻;类萌发素蛋白;基因克隆;盐碱胁迫;表达分析
Thompson等于1980年在研究小麦胚芽特定蛋白时首次发现了萌发素蛋白(Germin proteins)[1]。随后,许多与小麦萌发素蛋白结构相似的蛋白质被发现,这类蛋白质被命名为类萌发素蛋白(Germin-like proteins,GLPs)。GLPs是一类由多基因编码的位于细胞外基质的糖蛋白,通过离子键结合为稳定的低聚物而存在于细胞外基质中[2-3]。……
