张仕林++许玉超++帅强++邓鹏+++王建军

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.022

摘要：探讨洋葱不同组织总RNA提取的最优方法，以期为今后开展洋葱的分子生物学研究奠定基础。以洋葱品种W470发育旺盛时期的叶片、根、鳞茎为材料，比较TaKaRa试剂盒法、TIANGEN试剂盒法、TRIzol法、pBIOZOL法等4种RNA提取方法提取洋葱RNA的效果。凝胶电泳结果显示，除了TIANGEN试剂盒法不能提取洋葱根的总RNA，其他方法在洋葱不同组织中均可提取到不同质量的RNA。对不同方法提取洋葱RNA浓度、纯度进行检测发现，TaKaRa试剂盒法提取洋葱叶片的总RNA浓度为342.31 μg/g，pBiozol法提取洋葱鳞茎、根的总RNA浓度分别为 1 119.39、171.85 μg/mL。经RT-PCR验证，TaKaRa试剂盒法提取的洋葱叶片总RNA、pBIozol法提取洋葱鳞茎、根的总RNA均成功扩出洋葱β-actin基因片段。由结果可知，TaKaRa试剂盒适合提取洋葱叶片的总RNA，pBIOZOL法适合提取洋葱鳞茎、根的总RNA且质量能够满足后续试验要求。

关键词：洋葱；总RNA；RNA提取；RT-PCR

中图分类号：S633.201 文献标志码：A文章编号：1002-1302（2016）10-0095-03

收稿日期：2015-09-11

基金项目：国家公益性行业（农业）科研专项（编号：200903018）。

作者简介：张仕林（1989—），男，四川广元人，硕士研究生，研究方向为洋葱遗传育种与分子生物学。E-mail：709744424@qq.com。

通信作者：王建军，硕士，副教授，主要从事洋葱遗传育种研究。E-mail：wangjianjun@njau.edu.cn。洋葱（Allium cepa L.）为百合科葱属2年生蔬菜，在我国已广泛栽培，并作为主要的出口蔬菜品种之一[1]。洋葱不仅可以作为蔬菜和调味品，而且因其糖类、硫化物含量丰富，从而具有降“三高”、降低和预防血栓形成风险以及预防心肌梗塞等功效。此外，洋葱还含有特殊的营养物质槲皮素，能抑制癌细胞活性、阻止癌细胞生长、预防癌症[2]。……