张瑞赟，金 迪，曹 明，陈海戈，薛 蔚，黄翼然

(上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿科，上海 200127)

·临床研究·

新型循环肿瘤细胞计数与上皮/间质型探针标记技术在膀胱癌中的临床应用

张瑞赟，金 迪，曹 明，陈海戈，薛 蔚，黄翼然

(上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿科，上海 200127)

目的 本研究旨在探索在膀胱肿瘤中，新型循环肿瘤细胞(CTC)计数技术与基于RNA原位杂交的上皮/间质型探针标记技术的临床应用价值，初步探索上皮-间质转化在循环肿瘤细胞的作用与膀胱肿瘤肌层浸润的关系。方法 本研究纳入2015年5月至10月我院诊治的膀胱癌患者(cT1～4aN0M0)115名，同时纳入25名健康志愿者作为对照组。采用改良的CanPatrolTM法分离富集CTC，应用上皮型(Epi)探针(EpCAM、CK8/18/19)和间质型(Mes)探针(Twist、Vimentin)通过RNA原位杂交(RNA-ISH)对分离得到的CTC细胞进行EMT标记。结果 115名膀胱癌患者中93例(81%)患者为CTC阳性，健康志愿者共检测到CTC 0个(P<0.001)。对CTC进行RNA-ISH，发现肌层浸润型膀胱癌患者外周血CTC(P=0.049)、混合型CTC(P=0.018)及间质型CTC(P<0.001)的检出阳性率显著高于非肌层浸润性膀胱癌。pT1患者外周血CTC(P<0.001)、上皮型CTC(P=0.001)与混合型CTC(P<0.001)显著高于pTa患者。结论 新型循环肿瘤细胞(CTC)计数与基于RNA原位杂交的上皮/间质型探针标记技术可较敏感的检测出膀胱癌患者循环肿瘤细胞。间质表型CTC可能与肿瘤肌层浸润相关，提示EMT与膀胱肿瘤肌层浸润可能存在相关性。

膀胱癌；循环肿瘤细胞；上皮间质转化；肿瘤浸润； RNA原位杂交

膀胱癌(bladder carcinoma，BC)是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，位居世界范围内恶性肿瘤发病率第五位，每年全球新发病例约336 000例，死亡132 000例[1]。在我国，男性膀胱癌发病率位于全国恶性肿瘤的第七位且发病率逐年上升。70%的患者在初诊时为非肌层浸润性膀胱癌(nonmuscle invasive bladder cancer，NMIBC)，预后较好，但30%的患者为肌层浸润性膀胱癌(muscle invasive bladder cancer，MIBC)，50%肌层浸润性膀胱癌的接受根治手术前既已发生微转移灶，即使接受积极治疗亦不可避免地在2年内发生远处转移[2]。

研究表明实体瘤在最初的转移进程中，肿瘤细胞从原发病灶脱落，突破一系列屏障，进而趋化性移动进入淋巴管和血液循环形成循环肿瘤细胞(circulating tumor cells，CTCs)[3]。……