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土大黄根提取物对小鼠非特异性免疫功能的影响*

2016-12-29尤力都孜买买提阿布都吉力力阿布都艾尼热比姑丽伊斯拉木

中国药业 2016年10期
关键词:提取物体重小鼠

尤力都孜·买买提,阿布都吉力力·阿布都艾尼,热比姑丽·伊斯拉木

(1.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所,新疆 乌鲁木齐 830049; 2.新疆维吾尔医方剂学实验室,新疆 乌鲁木齐 830049)

土大黄根提取物对小鼠非特异性免疫功能的影响*

尤力都孜·买买提1,2,阿布都吉力力·阿布都艾尼1,2,热比姑丽·伊斯拉木1,2

(1.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所,新疆 乌鲁木齐 830049; 2.新疆维吾尔医方剂学实验室,新疆 乌鲁木齐 830049)

目的 探讨土大黄根提取物对正常小鼠非特异性免疫功能的影响。方法 采用小鼠体内吞噬廓清能力测定试验(惰性炭粒吞噬廓清法),观测土大黄根提取物(1,2,4 g/kg)灌胃给药后,小鼠的一般状况、体重、脾脏及胸腺指数、廓清指数。结果 土大黄提取物(1,2,4 g/kg)在试验期间小鼠的一般状况、体重、脾脏及胸腺指数变化无明显异常(P>0.05);各给药组虽能升高正常小鼠廓清指数,但其差异无统计学意义(P>0.05)。结论 土大黄根提取物对正常小鼠非特异性免疫功能(单核-巨噬细胞系统吞噬功能)有一定影响。

土大黄根提取物;小鼠;非特异性免疫

土大黄 RumexL.是蓼科 Polyonaceae酸模属 Rumex多年生草本植物,维吾尔药物名有阿提库拉克(Atkulak)、欧麻孜(Hummaz)、土日谢(Turux)、塔给库斯(Tagkusi),其药用部位为全草、叶子、根茎及根,用于肾、肝及胃肠疾患,并用于皮疹及皮肤瘙痒等[1-2]。本研究中通过小鼠体内吞噬廓清能力测定试验,探讨了土大黄根提取物对正常小鼠非特异性免疫功能的影响。

1 材料与方法

1.1 仪器、动物与试药

仪器:CPA1245型精密电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司);UV-7504C型紫外可见分光光度计(上海精科实业有限公司)。

动物:昆明种小鼠80只,雄性,体重18~22 g,由新疆实验动物研究中心提供,试验动物生产许可证号SCXK(新)2011-0001,试验动物使用许可证号SYXK(新)2011-0005。试验开始前检疫,经一般行为观察,选用符合要求的70只小鼠进行试验。

试药:土大黄根(新疆华安中药饮片有限责任公司,批号为12110),由新疆大学资源与环境科学学院努尔巴依·阿不都沙力克教授鉴定为土大黄根;醋酸地塞米松片(DXM,浙江仙琚制药股份有限公司,国药准字H33020822,批号为 140670,规格为每片 0.75 mg);消银颗粒(XYKL,陕西康惠制药股份有限公司,国药准字Z20000019,批号为130809,规格为每袋3.5 g);异常黏液质成熟剂[木尼孜其白里海密,维吾尔语命名为Munziq Balgam(MB),批准文号为M20052633],由新疆维吾尔自治区维吾尔医医院制剂室(GMP认证)提供。印度墨汁(Cat.NO.18060);碳酸钠(Na2CO3,天津永晟精细化工有限公司,批号为20111020)。

1.2 试验方法

土大黄根提取物的制备:土大黄根用乙醇室温密闭浸泡 1 h后回流提取3次,过滤,合并滤液减压浓缩,真空干燥,得干膏粉,试验时配成所需浓度。

体内吞噬廓清能力测定[3]:将70只小鼠随机分为7组,分别为空白对照组(CON组),地塞米松组(DXM组),消银颗粒组(XYKL组),异常黏液质成熟剂组(MB组),土大黄根醇提物低剂量组(RE-L组)、中剂量组(RE-M组)、高剂量组(RE-H组),每组10只。给予相应药物每10 g体重0.2 mL灌胃,每日1次,共10 d。末次给药后1 h,于小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁每10 g体重0.1 mL。于注入墨汁后2 min(T2)及10 min(T10)用特制取血吸管从小鼠眼眶后静脉丛取血20 μL,立刻吹入0.1%Na2CO3液2 mL中,吸管于该液中吸入、吸出数次,以充分洗出吸管壁附着血液,取血完毕,以20 μL正常小鼠血溶于2 mL 0.1%Na2CO3液校零,于UV-7504C型紫外可见分光光度计675 nm波长处比色,计算廓清指数(K)。K=(lg OD2-lg OD10)/(T10-T2),其中 OD2为T2时 OD值,OD10为T10时 OD值。

小鼠脏器指数测定:取小鼠脾脏、胸腺观察并称重,计算脏器指数。脏器指数=脏器质量/体重。

1.3 统计学处理

采用 SPSS 17.0统计软件。计量资料用 X±s表示,采用One-Way ANOWA方法行多组样本均数比较,检验水准 α=0.05。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠一般状况及体重变化

与CON组比较,阳性对照药物组(DXM组、XYKL组、MB组)、土大黄根醇提物组(RE-L组、RE-M组、RE-H组)小鼠在试验期间,行为活动、皮毛、粪便、饮食等均未见异常。与 CON组比较,DXM组、XYKL组小鼠体重减轻(P<0.05),其余各组小鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1 各组小鼠体重变化比较(X±s,g,n=10)

2.2 小鼠脏器指数和廓清指数变化

与CON组比较,DXM组正常小鼠脾脏指数、胸腺指数均显著降低(P<0.01),其余组对正常小鼠脾脏指数、胸腺指数无明显影响(P>0.05)。与CON组比较,各给药组虽能升高正常小鼠廓清指数,但其差异无统计学意义(P>0.05)。结果见表2。

表2 小鼠脏器指数及廓清指数变化(X±s,n=10)

3 讨论

机体免疫系统除T及B淋巴细胞外,还有自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、嗜中性粒细胞等,是同样具有免疫功能的细胞,这些细胞活性的测定对于研究中药对机体免疫功能的影响具有重要意义[4]。

小鼠体内吞噬廓清能力测定试验[5-6]是从整体水平测定单核-巨噬细胞系统(RES)的吞噬功能,常用方法有惰性炭粒廓清试验。当颗粒异物进入体内血液循环时,可迅速被单核-巨噬细胞吞噬而清除,其主要作用部位为肝、脾,故测定血中异物的清除能力可反映机体网状内皮系统(单核-巨噬细胞系统)的吞噬功能状况,以观察药物对该系统吞噬能力的影响。

本研究中通过小鼠体内吞噬廓清能力测定试验,探讨土大黄根提取物对正常小鼠非特异性免疫功能的影响。试验结果表明,小鼠灌胃给药10 d后,与空白对照组比较,各给药组小鼠在试验期间,行为活动、皮毛、粪便、饮食等未见异常;地塞米松组、消银颗粒组小鼠体重减轻(P<0.05);地塞米松组小鼠脾脏指数、胸腺指数降低(P<0.01);地塞米松组(1.02 mg/kg)、消银颗粒组(1.577 g/kg)、异常黏液质成熟剂组(2 g/kg)、土大黄根醇提物组(低、中、高剂量组,1,2,4 g/kg),虽能升高正常小鼠廓清指数(惰性炭粒吞噬廓清法),但其差异无统计学意义(P>0.05),提示土大黄根醇提物能对单核-巨噬细胞系统的吞噬功能有一定影响,有待深入研究。

[1]阿不力克木·努尔买买提阿吉,穆塔力甫·艾力阿吉·艾米奇.维吾尔医常用草药(维文)[M].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,2006:335-336.

[2]吐尔洪·吾买尔.维吾尔医生药学(维文,上册)[M].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,2006:362-363.

[3]张 帅,王红梅,常秀娟,等.热毒宁注射液抗菌及调节免疫活性作用研究[J].世界科学技术——中医药现代化技术应用研究,2015,17(5):1 056-1 060.

[4]郭金英,杜 洁,李彤辉,等.发状念珠藻胞外多糖对小鼠免疫活性的影响[J].河南科技大学学报:自然科学版,2015,36(1):72-75.

[5]陈 奇.中药药理研究方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2006:308-309,346-347.

[6]魏 伟,吴希美,李元建.药理实验方法学[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2010:1 299-1 300.

Effects of Rumex L.Root Extract on Non-Specific Immune Function of Mice

Yultuz Mamat1,2,Abdujilil Abdugheny1,2,Rabigul Islam1,2
(1.Inistitute of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049; 2.Xinjiang Laboratory of Traditional Uyghur Medicine Prescription,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049)

Objective To explore the effect of Rumex L.root extract on non-specific immune function of mice.M ethods Carbon clearance test was used in mice(inert carbon granule clearance method)to observe the effect of Rumex L.extract administration(1,2,4 g/kg)on mice in the general status,body weight,spleen and thymus index and then clearance index.Results There were no obvious abnormality in mice of Rumex L.root extract(1,2,4 g/kg)in the general status,body weight,spleen and thymus index(P>0.05);though the clearance index was increased in normal mice,there was no significant changes(P>0.05).Conclusion Rumex L.root extract has a certain influence on non-specific immune function(phagocytosis of mononuclear scavenger system)of mice.

Rumex L.root;mice;non-specific immunity

R285.5;R282.71

A

1006-4931(2016)10-0018-03

尤力都孜·买买提,女,大学本科,助理研究员,研究方向为维药药理毒理学,(电子信箱)1453187693@qq.com;热比姑丽·伊斯拉木,女,博士研究生,副研究员,研究方向为维药药理毒理学,本文通讯作者,(电子信箱)rabiya272@126.com。

2015-12-10)

*2015年新疆维吾尔自治区公益性基金项目,项目编号:KY2015139,KY2015138。

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