马一铭,李丽,蔡红雁,胡钊,郭涛

基础与实验研究

体外震波对人脐静脉内皮细胞增殖、细胞周期及细胞间黏附因子-1表达的影响

马一铭,李丽,蔡红雁,胡钊,郭涛

目的:观察体外震波治疗对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、细胞周期及细胞间黏附因子-1(ICAM-1)表达的影响。

方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞分组,实验部分分别给予0.03、0.09、0.18、0.24 mJ/mm2能量震波500击处理(分别设定为0.03、0.09、0.18、0.24 mJ/mm2能量组),对照组不给予震波处理。细胞计数试剂盒(CCK)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应(PCR)及蛋白质印迹方法(Westen blot)分别检测低能量震波处理后ICAM-1信使核糖核酸( mRNA) 和蛋白的表达水平。

结果:CCK 比色法检测结果显示:只有0.09 mJ /mm2能量组与对照组比能促进HUVECs增殖,且差异有统计学意义(P<0.05),而其他能量组与对照组比,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同能量组与对照组比较,0.09 mJ/mm2能量组G0/G1期细胞比例明显减少(P<0.05),S期和G2/M期细胞比例明显增加(P<0.05),0.03 mJ/mm2能量组仅增加G2/M期细胞比例(P<0.05),而其他能量组与对照组比差异均无统计学意义(P>0.05)。实时定量PCR检测显示:0.09 mJ/mm2能量组ICAM-1 mRNA表达均较对照组明显增高(9.27±0.95 vs 1.02±0.27,P<0.001),0.03 mJ/mm2能量组ICAM-1 mRNA表达均较对照组亦增高(7.08±0.60 vs 1.02±0.27,P<0.01)。Westen blot检测显示:0.09 mJ/mm2能量组ICAM-1蛋白表达较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。

结论:体外震波治疗,特别是0.09 mJ/mm2能量的体外震波能加速HUVECs细胞周期由G0期/G1期向S期和G2/M期的转换,促进细胞增殖,并且提高ICAM-1的表达,这在体外震波促进血管新生机制中起重要作用。

体外震波治疗;脐静脉;内皮细胞;细胞周期

(Chinese Circulation Journal, 2016,31:1013.)

体外震波作为物理疗法,已成功运用于泌尿系结石、胆道结石、骨骼肌肉系统疾病、肩周炎、糖尿病足等多年,近年来发现体外震波能促进血管新生用于冠心病治疗,改善心肌缺血。目前国内外已在细胞水平、动物实验、临床水平证实了其促血管新生的确切疗效,且有效能量级别为0.09 mJ /mm2(相当于体外震波碎石能量的1/10)[1-4],但其显效机制目前尚不明确。……