当归饮片蛋白质的提取与活性分析
2016-12-22潘剑茹张小梅李玲玲王香玲吴伦巧陈莉娟
潘剑茹, 张小梅, 李玲玲, 王香玲, 吴伦巧, 陈莉娟, 李 娴
( 福州大学 生物科学与工程学院, 福州 350108 )
当归饮片蛋白质的提取与活性分析
潘剑茹*, 张小梅, 李玲玲, 王香玲, 吴伦巧, 陈莉娟, 李 娴
( 福州大学 生物科学与工程学院, 福州 350108 )
当归是传统的补血中药,其所含的多糖与小分子已有大量的研究,然而当归中的蛋白质组成与功效仍无人知晓。该研究通过0.05 mol·L-1Tris-HCl(pH=8.0)缓冲液浸提和组织匀浆得到当归饮片粗提液,结合硫酸铵沉淀和透析法去除粗提液中的多糖及还原糖等小分子成分,得到当归饮片总蛋白质,并首次对其组成和生物活性进行了研究。结果表明:当归饮片蛋白含量较高,分子量为17.5~90.7 kDa,其中 17.5 kDa的蛋白含量最高,达47%。饮片蛋白在pH 5~11范围内较为稳定,pH为3时,仅余少量17.5 kDa的蛋白。当归饮片蛋白质中至少有3种蛋白在80 ℃内稳定存在,其中热稳定性最好的是17.5 kDa的蛋白,在热处理温度达到100 ℃时,仍然稳定存在,但随着处理时间的延长,该蛋白有部分单体发生了交联反应。当归饮片蛋白质具有清除DPPH自由基的能力,且该能力随着热处理温度及热处理时间的增加而增加,pH处理会影响该能力,pH为5.0时,清除能力最高,5.0两侧清除能力均下降。此外,当归饮片蛋白质对细胞有很强的选择性,表现为对正常肝细胞L-02有显著的增殖作用(1.0~4.0 mg·mL-1,P<0.01),对白血病细胞K562则表现出显著的抑制作用(0.5~1.5 mg·mL-1,P<0.01),当归饮片蛋白浓度为1.0 mg·mL-1时,可使L-02细胞增值率达550% (P<0.01),而K562细胞的抑制率达18.3% (P<0.01)。综上所述,当归饮片饮片蛋白具有重要的生物活性,可望从中开发出具有保肝作用的药物蛋白。
当归饮片, 蛋白质, 稳定性, DPPH自由基, 细胞增殖
当归(Angelicasinensis)为伞形科多年生草本植物当归的干燥根,其在中国、韩国和日本,作为香料、补药或药物,已有一千多年的使用历史,至今仍作为一种传统中药在中国中医界广泛使用(Williamson et al,2013)。……
