顺铂处理后几种hTERT mRNA剪接异构体的变化*
2016-12-21杨梦莉陈香岭廉亚茹马春霞姚宇峰马千里俞建昆
杨梦莉, 陈香岭, 隋 旭, 廉亚茹, 马春霞, 姚宇峰, 史 荔, 马千里, 俞建昆**
(1.中国医学科学院 北京协和医学院 医学生物学研究所, 云南 昆明 650118; 2.昆明理工大学, 云南 昆明 650093; 3.昆明医学大学第三附属医院 胸外科, 云南 昆明 650118)
顺铂处理后几种hTERTmRNA剪接异构体的变化*
杨梦莉1, 陈香岭1, 隋 旭2, 廉亚茹1, 马春霞1, 姚宇峰1, 史 荔1, 马千里3, 俞建昆1**
(1.中国医学科学院 北京协和医学院 医学生物学研究所, 云南 昆明 650118; 2.昆明理工大学, 云南 昆明 650093; 3.昆明医学大学第三附属医院 胸外科, 云南 昆明 650118)
目的: 利用顺铂处理肺癌、宫颈癌细胞和人胚肾细胞,检测人类端粒酶逆转录酶催化亚单位(hTERT)mRNA的选择性剪接是否发生变化。方法:将培养的肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和CaSki细胞及人胚肾293FT细胞分为实验组和对照组,用顺铂处理实验组细胞,DMSO处理对照组细胞;设计hTERT α+β+、α+β-、α-β+、INS3及DEL[e2]引物,提取两组细胞的总RNA,利用RT-PCR检测hTERTmRNA 剪接异构体表达。结果:与对照组细胞相比,随着顺铂浓度的增加,肺癌A549和H1299细胞,宫颈癌C33A、SiHa和CaSki细胞以及人胚肾293FT细胞中hTERTα+β- 和INS3异构体比例升高,而DEL[e2]异构体变化不明显。结论:在顺铂引起的DNA损伤情况下,细胞可利用hTERTmRNA选择性剪接调控机制进行调节,通过改变不同异构体的量和所占比例,从而调节端粒酶功能活性。
肺肿瘤; 宫颈肿瘤; 人胚肾细胞; 细胞,培养的; 人类端粒酶逆转录酶催化亚单位; 顺铂
端粒是真核细胞线性染色体的末端物质,由TTAGGG重复序列构成,端粒DNA序列具有高度保守性,在维持染色体稳定性中起重要作用。人端粒酶主要由两个亚单位组成,即端粒酶RNA(hTR)和催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)[1]。……
