快速检测牛奶中泰乐菌素残留的荧光微球免疫层析方法的建立
2016-12-21武会娟裴星瑶江海洋
王 旗 , 管 笛 , 武会娟 , 裴星瑶 , 彭 涛 , 江海洋
(1.中国农业大学动物医学院 , 北京海淀100193 ; 2.北京市理化分析测试中心 , 北京海淀100089 ;3.北京市基因测序与功能分析工程技术研究中心 , 北京海淀100094)
快速检测牛奶中泰乐菌素残留的荧光微球免疫层析方法的建立
王 旗1,2,3, 管 笛2,3, 武会娟2,3, 裴星瑶1, 彭 涛1, 江海洋1
(1.中国农业大学动物医学院 , 北京海淀100193 ; 2.北京市理化分析测试中心 , 北京海淀100089 ;3.北京市基因测序与功能分析工程技术研究中心 , 北京海淀100094)
本研究旨在研制一种快速检测牛奶中泰乐菌素残留的荧光微球免疫层析试纸条。将包被抗原(0.80 mg/mL)和羊抗鼠IgG(1.01 mg/mL)喷涂在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质检线。对制备荧光微球抗体免疫复合物(免疫探针)的工艺参数做了一系列的优化,同时比较了不同标记方法对标记效率及稳定性的影响。结果表明,在pH值为6.0的最佳缓冲体系条件下,催化剂碳化二亚胺(EDC)用量为5 μg,抗体100倍稀释添加20 μL,检测时间低于25 min,检测限为25 μg/L。本试验研制的荧光微球免疫层析试纸条具有简便快速、特异性良好、样本无需前处理等特点,可用于基层奶站和现场快速筛选。
荧光微球 ; 泰乐菌素 ; 免疫层析方法 ; 试纸条
目前牛奶中泰乐菌素(tylosin,TYL)残留的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)[1]、高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)[2]和酶联免疫吸附法(ELISA)[3]。这些方法虽然准确可靠,但是前处理复杂且费用昂贵,而免疫层析方法因简便快速、成本低廉得到广泛应用。胶体金作为主要标记物,具有对标……
