杨树LAR基因的克隆及表达对儿茶素合成的影响
2016-12-21苏衍修常聚普郭利民王延伟
左 涛 ,包 海 ,陈 慧 ,苏衍修 ,常聚普 ,郭利民 ,贺 伟 ,王延伟
(1.北京林业大学 a.林木有害生物防治北京市重点实验室;b.北京林业大学林木育种国家工程实验室;c.林木花卉遗传育种教育部重点实验室,北京 100083;2. 濮阳市林业科学院,河南 濮阳 457000)
杨树LAR基因的克隆及表达对儿茶素合成的影响
左 涛1a,b,c,包 海1b,c,陈 慧1b,c,苏衍修2,常聚普2,郭利民2,贺 伟1a,王延伟1b,c
(1.北京林业大学 a.林木有害生物防治北京市重点实验室;b.北京林业大学林木育种国家工程实验室;c.林木花卉遗传育种教育部重点实验室,北京 100083;2. 濮阳市林业科学院,河南 濮阳 457000)
无色花色素还原酶基因(Leucoanthocyanidin reductase,LAR)是类黄酮生物合成途径中的一个重要基因,为了验证杨树中LAR的功能,明确LAR基因对抗病物质儿茶素合成的影响,本实验以接种后第6 d的一年生‘中林46’杨树树干的树皮为材料, 利用RT-PCR技术克隆了LAR基因的OFR序列,并构建LAR的过表达载体pCAMBIA1301-LAR。采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,获得了转LAR基因的烟草6株。用qRT-PCR检测转基因烟草的表达量,结果显示,在转基因植株中,LAR基因的表达量均显著上调。用高效液相色谱法检测转基因植株中的儿茶素含量,结果显示,6株转LAR的烟草植株中,有4株内源儿茶素含量显著升高。以上结果表明,中林46杨LAR是杨树类黄酮生物合成途径中的一个基因,该基因与儿茶素的合成有关。
类黄酮;无色花色素还原酶基因;过表达;儿茶素
类黄酮是一类重要的次生代谢物,广泛存在于整个植物界中,从苔藓植物到被子植物均含有此类物质。……
