白会新，王靓靓，单安山

（1.大庆市畜牧兽医局，黑龙江大庆163311；2.东北农业大学动物营养研究所，哈尔滨150030）

饲粮中添加黄腐酸对生长肥育猪抗氧化性能的影响

白会新1，2，王靓靓1，单安山2

（1.大庆市畜牧兽医局，黑龙江大庆163311；2.东北农业大学动物营养研究所，哈尔滨150030）

文章旨在研究饲粮中添加不同剂量的黄腐酸（fulvic acid,FA）对生长肥育猪抗氧化性能的影响。选取平均体重（30.0±2.5）kg的长大二元杂种生长猪180头，随机分为5组，每组6个重复，每个重复6头猪。对照组饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮中分别添加0.2%、0.4%、0.6%和0.8%FA。当试验猪平均体重达90 kg时结束饲养试验。结果表明，与对照组相比，添加0.4%FA显著提高猪血清中总抗氧化能力（P<0.05）；添加0.6%FA显著提高猪血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶活性（P<0.05）；添加0.4%和0.6%FA显著提高猪血清中超氧化物歧化酶活性（P<0.05）；添加0.2%、0.4%和0.6%FA猪血清中丙二醛含量均显著降低（P<0.05），且添加0.4%FA显著降低猪肌肉中丙二醛含量（P<0.05）。综上所述，在本试验条件下，饲粮中添加0.4%～0.6%的FA有利于提高生长肥育猪的抗氧化性能。

黄腐酸；生长肥育猪；抗氧化性能

腐植酸是一种结构较为复杂的高分子质量有机弱酸混合物[1]，其所含有的黄腐酸（FA）不仅分子量最小且结构与腐植酸最为相似，可促进动植物生长[2]、增强机体免疫能力[3]、抗炎杀菌[4]、提高抗病力[5]。FA中含有的酚羟基官能团有提高机体抗氧化的作用，参与生物体中单电子氧化还原过程，对动植物体组织细胞脂质过氧化作用有一定的抑制作用[6-7]。有研究报道，FA能够降低小鼠、家禽组织中的丙二醛含量，提高过氧化物酶、超氧化物歧化酶以及谷胱甘肽过氧化氢转移酶的活性[8-9]；降低盐碱胁迫下的小麦根系活性氧的积累，增强过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性[10]。然而，FA作为饲料添加剂对猪抗氧化能力的报道较少，本文在前人研究的基础上，在饲粮中添加FA研究其对生长肥育猪抗氧化能力的影响，探讨FA的抗氧化机理和作为饲料添加剂的适宜添加量。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用的天然FA由内蒙古永业农丰生物科技有限责任公司提供，该产品提取自风化煤和褐煤，FA含量实测值为12.05%。

1.2 试验设计与饲粮

采用单因素完全随机试验设计，选取平均体重为（30±2.5）kg的长大二元杂种生长猪180头，随机分为5组，每组6个重复，每个重复6头猪。对照组饲喂基础饲粮，试验组饲喂在基础饲粮中分别添加0.2%、0.4%、0.6%和0.8%FA的试验饲粮。试验猪平均体重达90 kg结束饲养试验。试验期为87 d。

采用玉米-豆粕型基础饲粮，饲养水平参照猪饲养标准（NY/T 65—2004）及NRC（1998）生长肥育猪的饲养标准分阶段配制，其组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）

1.3 饲养管理

饲养试验于2011年9月1日至11月26日在河南省正阳种猪场繁育中心进行，猪只饲喂干粉料，自由采食和饮水。猪舍为全砖结构、水泥地面，每个圈分内外两部分，内部为采食休息场所，外部为运动场，且每圈各设有1个料槽和1个鸭嘴式饮水器。按照猪场常规管理措施进行驱虫、消毒和免疫。

1.4 检测指标与方法

试验结束后，对试验猪禁食12 h，以重复为单位，每个重复随机选取1头试验猪（共计30头），用真空采血管进行前腔静脉采血10 mL，3 000 r/min离心10 min，分离血清，将血清分装于EP管中并编号，-20℃保存待测。

将采血后的试验猪拉至屠宰场，屠宰后取适量的肝脏和背最长肌，研钵进行研磨，用生理盐水稀释成10%组织匀浆，放于-20℃冰箱中保存待测。

试验室检测在东北农业大学动物营养研究所进行。测定血清和组织匀浆中总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）。其中血清和组织匀浆中SOD活性测定采用黄嘌呤氧化物酶法，GSH-Px活性采用NADPH法，MDA含量测定采用硫巴比妥酸法（TBA），组织匀浆蛋白质测定采用考马斯亮兰法（CBB）。测定均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒，在日本岛津UV-2401 PC紫外可见分光光度计上进行测定。

1.5 数据处理

试验数据先用Microsoft Excel（2013）进行整理和初步计算，然后采用SPSS 18.0统计软件的一般线性模型（GLM）程序对试验数据进行单因素方差分析，用Duncan法对各组间平均数进行多重比较。试验结果采用平均值±标准误表示，以P<0.05作为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 FA对生长肥育猪血清及组织中T-AOC的影响

由表2可知，与对照组相比，各试验组血清、肝脏和肌肉中的T-AOC均有提高，其中0.4%FA组血清中的T-AOC提高45.8%，达到差异显著性水平（P<0.05）。

表2 FA对生长肥育猪血清和组织中T-AOC的影响

2.2 FA对生长肥育猪血清及组织中GSH-Px活性的影响

由表3可知，与对照组相比，各试验组血清、肝脏和肌肉中的GSH-Px活性均有提高，其中0.6%FA组血清和肝脏中的GSH-Px活性分别提高28.7%和138%，均达到差异显著性水平（P＜0.05）。而0.6%FA组肌肉中GSH-Px活性虽较对照组提高34.25%，但并未表现出显著性影响（P＞0.05）。

表3 FA对生长肥育猪血清和组织中GSH-Px活性的影响

2.3 FA对生长肥育猪血清及组织中SOD活性的影响

由表4可知，与对照组相比，各试验组血清、肝脏和肌肉中的SOD活性均有提高，其中0.4%FA和 0.6%FA组血清中的SOD活性分别提高12.7%（P＜0.05）和12.3%（P＜0.05），0.4%FA组的肝脏和肌肉中SOD活性虽均为所有处理组中最高，但与对照组相比无显著性差异（P＞0.05）。

表4 FA对生长肥育猪血清和组织中SOD活性的影响

2.4 FA对生长肥育猪血清及组织中MDA含量的影响

由表5可知，随着FA含量的增加，血清、肝脏和肌肉中MDA含量先降低后慢慢升高。与对照组相比，0.2%、0.4%和0.6%FA组血清中MDA含量分别降低21.1%、26.1%和24.6%，均达到差异显著水平（P＜0.05），0.4%FA组肌肉中MDA含量降低29.9%，差异显著（P＜0.05）。

表5 FA对生长肥育猪血清和组织中MDA含量的影响

3 讨论

机体可通过酶和非酶系统产生氧自由基。氧自由基化学性质非常活跃，能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引起脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物，如丙二醛、酮基、氢过氧基或内过氧基以及新的氧自由基等。丙二醛可与类脂、蛋白质形成交联物，使酶的结构和功能遭到破坏，从而进一步降低抗氧化酶的活性[11]，形成恶性循环，使机体抗氧化功能持续受损，此时体内的抗氧化酶系统对机体起动态的保护作用，平衡机体氧化反应的发生。在机体正常的新陈代谢过程中，体内的抗氧化酶（如SOD、GSH-Px）可协同作用，催化超氧阴离子自由基（O2-）发生歧化反应（O2-+O2-+H+→H2O+O2），消除体内氧自由基的派生源，减轻自由基链式反应对机体的损害[12]，通过减少脂质过氧化物及其降解产物的产生，提高机体的抗氧化能力[13]。

SOD和GSH-Px作为动物体内消除自由基损伤的主要防御酶，可催化超氧阴离子自由基的歧化反应，阻断自由基的连锁反应，减少体内脂质氧化，是常用抗氧化功能强弱的指标[14]。本研究发现，在饲粮中添加FA能提高血清、肝脏和肌肉中的SOD和GSH-Px活性，当添加量分别为0.4%和0.6%FA时，SOD和GSH-Px活性分别为最高，且两种酶活性不随黄腐酸添加剂量的增加而提高，而是呈现上凸抛物线图形变化。同时显著性分析发现，添加0.6% FA组血清和肝脏中的GSH-Px活性显著高于对照组，添加0.4%和0.6%FA组的血清中的GSH-Px活性显著高于对照组，这与栾白等[15]和王晶等[9]试验结果相一致，说明黄腐酸可提高组织中的SOD和GSH-Px活性。T-AOC是衡量机体总抗氧化能力的指标，它的高低代表机体的总抗氧化能力。试验中0.4%FA组血清、肝脏和肌肉T-AOC均为最高，且肥育猪血清中的T-AOC达到显著性差异，肝脏和肌肉中提高并不显著。综合前人研究黄腐酸对生长肥育猪生产性能[16]与血液生化指标[17]影响结果，判断生长肥育猪饲粮中添加0.4%～0.6%FA能显著提高机体抗氧化酶的活性。

MDA是脂质过氧化物形成的毒性较强的产物，是由生物体内产生的氧化自由基[18]。它可以攻击生物膜中的不饱和脂肪酸，引起脂质发生过氧化作用而产生的[19-20]。MDA的含量可以间接反映生物膜脂质过氧化的大小和对细胞膜结构伤害程度的指标[21-22]。研究表明，小鼠注射腐植酸溶液可以降低小鼠肝脏、肌肉和血清中MDA的含量，降低机体的脂质过氧化能力[6]。王晶等[9]也证实，在42日龄肉鸡饲粮中添加0.4%和1%黄腐酸可显著降低血清中MDA含量。本研究表明，添加FA的试验组血清、肝脏和肌肉中的MDA含量均较对照组有所降低，且0.4%和0.6% FA组猪肌肉中MDA含量显著降低（P<0.05），说明FA能减轻自由基对机体分子结构损伤。从试验结果来看，这种变化并不是随FA添加剂量增大而提高，抗氧化性能也并非活性越大越好。然而，产生这种情况的具体原因及黄腐酸对其脂质过氧化研究机理还不明确，需待进一步研究。

4 结论

饲粮中添加FA可增强生长肥育猪的抗氧化机能，其中添加0.4%～0.6%的FA可显著提高生长肥育猪的抗氧化能力。

[1]Hendrickson J B,Gram D T,Hammod G S.Oragnic Chemistry[M]. Boston:Willard Grant Press,1970:287-288.

[2]白会新，王靓靓.黄腐酸类饲料添加剂在猪生产中的应用[J].饲料工业，2015（S2）:1-4.

[3]李素芬，冯敏山，阎国红.生化黄腐酸对肉用仔鸡生产性能及免疫器官的影响[J].中国饲料，2000（14）：14-15.

[4]高金岗，王锐萍，安飞飞，等.生化黄腐酸抑菌作用的研究[J].安徽农业科学，2012，40（26）：12750-12751.

[5]汪善锋，汪海峰，陈安国.生化黄腐酸的应用效果与作用机理[J].中国饲料，2004（22）：8-10.

[6]张法浩，李蓉，许善锦，等.黄腐酸引发大鼠肝细胞氧自由基产生的研究[J].科学通报，1993，38（13）：1235-1237.

[7]林梅桂.矿源黄腐酸对甜椒幼苗生长和耐热性的影响[J].福建农林大学学报（自然科学版），2013（6）：593-599.

[8]曾述之，张穗芳，相阳，等.不同来源黄腐酸对大鼠组织细胞脂质过氧化的影响[J].腐植酸，1990（2）：9-14.

[9]王晶，张海军，武书庚，等.饲粮中添加黄腐酸对肉仔鸡生产性能和血液生化指标的影响[J].动物营养学报，2013，25（1）：140-147.

[10]郭伟，王庆祥.腐植酸浸种对盐碱胁迫下小麦幼苗抗氧化系统的影响[J].应用生态学报，2011，22（10）：2539-2545.

[11]马莉，胡迎芬，马爱国，等.冬枣提取物对S180荷瘤小鼠的抗氧化作用研究[J].青岛大学学报，2008，23（3）：30-34.

[12]Kinnul VL,Crapo J D,Raivio K O.Generation and disposal of reactive oxygen metabolites in lung[J].Lab Invest,1995,73(1):3-9.

[13]余姮，颜培实.蛋白螯合铜对生长肥育猪抗氧化性能的影响[J].江苏农业科学，2010（5）：288-291.

[14]冯军安.调肝理脾方对酒精性肝纤维化干预作用的实验和临床研究[D].北京：北京中医药大学，2008.

[15]栾白，高同国，姜峰，等.微生物降解褐煤产生的黄腐酸对大豆种子萌发及主要抗氧化酶活性的影响[J].大豆科学，2010（4）：65-68.

[16]白会新，常启发，石宝明，等.黄腐酸对生长育肥猪的生产性能、胴体性状和肉品质的影响[J].动物营养学报，2013，25（1）：133-139.

[17]Chang Q,Lu Z,He M,et al.Effects of dietary supplementation of fulvic acid on lipid metabolism of finishing pigs[J].J Anim Sci,2014,92(11):4921-4926.

[18]刘军.1，2，4-三氯苯对小鼠抗氧化系统的影响[D].沈阳：中国医科大学，2002.

[19]Jian M,Jia J F,Zheng R G,et al.A new hypothesis about the relationship between free radical reactions and hemorheological propertiesin vivo[J].Med Hypotheses,1993,41(6):516-520.

[20]Corino C,Magni S,Pastorelli G,et al.Effect of conjugated linoleic acid on meat quality,lipid metabolism and sensory characteristics of dry-cured hams from heavy pigs[J].J Anim Sci,2003,81:2219-2229.

[21]Holdom M D,Lechenne B,Hay R J,et al.Production and characterization of recombinant aspergillus fumigatus Cu,Zn superoxide dismutase and its recognition by immune human sera[J].J Clin Microbiol,2000,38(2):558-562.

[22]蒋守群，周桂莲，蒋宗勇.饲粮维生素E水平对43～63日龄黄羽肉鸡肉品质和抗氧化功能的影响[J].动物营养学报，2012，24（4）：646-653.

（编辑：富春妮）

经常运动能让大脑年轻10岁

【美国《时代》周刊网站3月23日报道】我们知道，运动有益于身体和大脑，但坚持运动有时候并不容易。

当不想出汗的时候，科学证据给你提供新的动力：美国《神经学》周刊发表的一项新研究称，运动可以减缓大脑衰老，最多可年轻10岁。

这是给出具体数字说明运动对大脑有何益处的首批研究之一。研究人员询问了1 228名不同种族和民族背景的曼哈顿男女居民各自的运动习惯。他们还做了包括记忆力、系统性、逻辑性和思考速度在内的认知能力的测试问卷。五年后，研究人员对大概一半的人进行了同样的测试。

运动较多的人测试得分也更高。但当研究人员把高血压、糖尿病和心脏病等因素考虑进去以后，这种关联就消失了。研究报告的资深作者、美国迈阿密大学神经学与公共卫生学副教授克林顿·赖特说，这类疾病可能妨碍脑部供血，从而破坏认知功能。

接下来，赖特和同事们只关注不存在这些供血风险的人，比较他们该研究前后的测试成绩。他们发现，运动更多的人得分也更高。此外，这种倾向在思考速度和对某段往事的记忆力这两方面尤其突出。

（转自参考消息[N]，2016-03-26）

Effects of Dietary Supplementation Fulvic Acid on Antioxidation in Growing-finishing Pigs

BAI Huixin1,2,WANG Jingjing1,SHAN Anshan2
(1.Daqing Bureau of Animal Husbandry and Veterinary,Daqing 163311,China; 2.Institute of Animal Nutrition,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China）

The objective of the study was to evaluate the effects of dietary supplementation with different dose of FA(fulvic acid)on antioxidation in growing-finishing pigs.A total of 180 crossbred(Landrace×Yorkshire)pigs with an average body weight(30.0±2.5)kg were randomly allotted to five treatment groups with six pens per treatment and six pigs in per pen.The pigs were given a basal maize-soybean meal diet supplemented with 0.2%,0.4%,0.6%,or 0.8%FA,respectively.When the pigs were weighted at the average weight of 90 kg,the trial was the end.The result showed as follows:compared with control group,the activities of T-AOC,GSH-Px and SOD in serum,liver and muscle tissue were high in FA diets treatments groups.When pigs were slaughter, there was significant difference(P<0.05)for activity of T-AOC in the serum,and the activity of GSH-Px of serum and liver tissue were higher(P<0.05)in pigs fed 0.6%FA diet.The activity of SOD of serum in pigs fed 0.4% and 0.6%FA diets had a significantly difference(P<0.05).Compared with control groups,inclusion of 0.2%, 0.4%and 0.6%FA groups were decreased(P<0.05)significantly in the content of MDA in serum of 90 kg pigs. In conclusion,dietary supplementation with fulvic acid can,to some extent,improve function of antioxidation in growing-finishing pigs.Overall,0.4%～0.6%FA had more beneficial effects than other doses in the growing-finishing pigs.

fulvic acid;growing-finishing pigs;antioxidation

S816.7

A

1002-1957(2016)03-0018-04

2016-03-15

现代农业产业技术体系建设专项资金（CARS-36）

白会新（1986-），男，黑龙江望奎人，畜牧师，硕士，主要从事猪营养与饲料研究工作.E-mail:neaubhx@163.com

单安山（1958-），男，辽宁东港人，教授，博士生导师，主要从事动物营养与饲料研究工作.E-mail:asshan@neau.edu.cn