董海影 张 春 弓 箭 张晓杰 李春旭

(齐齐哈尔医学院临床病理诊断中心，黑龙江 齐齐哈尔 161006)



芍药苷对大鼠皮质酮损伤的海马神经元TrkB/BDNF信号通路的影响

董海影 张 春1弓 箭 张晓杰 李春旭

(齐齐哈尔医学院临床病理诊断中心，黑龙江 齐齐哈尔 161006)

目的 观察芍药苷对皮质酮诱导海马神经元损伤的影响。方法 体外培养新生SD大鼠海马神经元，采用皮质酮诱导原代培养海马神经元建立皮质酮损伤模型。培养体系中加入不同浓度的芍药苷进行预处理。采用WST-1法检测芍药苷对神经元存活率的影响，应用PCR与Western印迹检测神经元脑源性神经营养因子(BDNF)与酪氨酸激酶受体B(TrkB)的表达。结果 与皮质酮组相比，中高剂量芍药苷可明显增加海马神经元活力(P<0.05)，可明显增加海马神经元TrkB与BDNF的 mRNA与蛋白表达水平(P<0.05)。结论 芍药苷对皮质酮诱导的原代培养海马神经元损伤具有保护作用，具有抗抑郁作用。

芍药苷；海马神经元；TrkB/BDNF

芍药具有养血调经、柔肝止痛、平抑肝阳等功效，主要有效成分为芍药苷〔1〕，具有显著的抗抑郁样活性〔2〕。本实验主要研究芍药苷对皮质酮诱导海马神经元损伤和脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶受体B(TrkB)表达的影响，进而探讨芍药苷抗抑郁的作用机制。

1 材料与方法

1.1 药物、试剂及动物 芍药苷标准品(CAS：23180-57-6)；细胞核蛋白与细胞质蛋白抽提试剂盒(Beyotime公司，P20028)；TRIzon Reagent 总RNA提取试剂盒，Prime ScriptTMRT reagent Kit(TaRaKa，cat：RR370A)，SYBR Premix Ex Taq(TaKaRa，cat：RR420A)。原代海马神经元源于新生24 h的SD大鼠的乳鼠，清洁级，雌雄不限。

1.2 方法

1.2.1 海马神经元的原代培养 选取新生24 h内的SD大鼠的乳鼠，将其置于无菌环境下，借助于解剖显微镜取出海马，将收集的海马组织修剪为约1 mm3，置于预冷的HBSS培养皿中，加入预热的0.25%EDTA-胰蛋白酶溶液，在37℃水浴条件下消化15 min；……