王爱娜，崔宇宏

(山西省食品药品检验所，山西太原　030001)

麝香保心丸薄层色谱一标多测研究

王爱娜，崔宇宏

(山西省食品药品检验所，山西太原030001)

目的:建立麝香保心丸薄层一标多测方法。方法:采用薄层色谱法，将现行标准6个独立的TLC鉴别修订为2个TLC鉴别控制6个药味。结果:各薄层色谱斑点清晰，分离效果好，阴性对照无干扰。结论:该方法简便易行，重现性好，可用于麝香保心丸的快检技术。

麝香保心丸;一标多测;薄层色谱

麝香保心丸具活血祛瘀、舒经活络、消肿止痛功效，用于各种跌打损伤、瘀血肿痛、风湿瘀阻、关节肿痛。原标准鉴别项收载6个鉴别，包括5个薄层鉴别(鉴别蟾酥中华蟾酥毒基、酯蟾毒配基;人参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1;肉桂中肉桂酸;牛黄中胆酸、去氧胆酸;冰片)及1个气相色谱法(鉴别人工麝香中麝香酮)，方法费时费力［1］。为了达到快速、简便、省时、省力的目的，从供试品溶液的制备、展开系统及薄层板的选择多个方面考虑，将原标的鉴别合并为2块薄层板，鉴别了处方中的6味药材。1块薄层板鉴别人工麝香、蟾蜍、苏合香、冰片4味药材，另1块同时鉴别人工牛黄、人参［2-3］。其中肉桂药材的鉴别经过多次实验摸索，都未能与上述薄层鉴别合并，故除了处方中肉桂未鉴别外，其余6味药材均建立了快速、简便的方法。

1　试药及试剂

对照药材及对照品:麝香酮(110719-200613)、冰片(110743-200303)、华蟾酥毒基(1100803-200605)、酯蟾毒配基(110718-200507)、苏合香(931-9402)、人工牛黄(121197-200903)、人参皂苷 Rg1(110703-200425)、人参皂苷Re(110754-200421)、人参皂苷Rb1(110704-200420)均购自中国药品生物制品检定所。

样品:上海和黄药业样品。

试剂:硅胶G、硅胶GF254高效预制板(青岛海洋化工厂、烟台市化学工业研究所、merck板)，其余试剂均为分析纯。

2　实验与结果

2.1人工麝香、蟾蜍、苏合香、冰片的薄层鉴别

将处方中4味药材的薄层鉴别合并，以一块薄层板、两种展开系统同时鉴别人工麝香、蟾蜍、苏合香、冰片4种药材。

2.1.1供试品溶液的制备取本品2g，研细，加二氯甲烷15 mL，冰水浴超声处理15 min，滤过(滤渣备用)，取滤液1 mL作为供试品溶液Ⅰ(鉴别冰片);其余滤液挥至近干，残渣加乙酸乙酯1 mL转移至具塞试管中，加1 mL二硝基苯肼试液，振摇使混匀，放置，取上层乙酸乙酯液作为供试品溶液Ⅱ(鉴别人工麝香、蟾蜍、苏合香)。

2.1.2对照品溶液的制备取冰片对照品，加二氯甲烷制成每1 mL含3 mg的溶液;取酯蟾毒配基、华蟾酥毒基对照品，加乙酸乙酯制成每1 mL分别含1 mg的混合溶液作为对照品溶液。另取麝香酮对照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含2 mg的溶液，取溶液1 mL，加1 mL二硝基苯肼试液，振摇使混匀，放置，取上层乙酸乙酯液作为对照品溶液。另取苏合香对照药材，加二氯甲烷制成每1 mL含10 mg的溶液，作为对照药材溶液。

2.1.3阴性对照品溶液的制备(所用药材由生产单位提供)取处方中各药味(除冰片、人工麝香、蟾蜍、苏合香)1/100处方量，模拟制法，分别制备缺冰片、人工麝香、蟾蜍、苏合香的对照溶液，按供试品溶液的制备方法制备，即得。

2.1.4薄层层析吸取上述供试品溶液Ⅰ及冰片对照品溶液各2 μL，供试品溶液Ⅱ、苏合香对照药材、酯蟾毒配基、华蟾酥毒基及麝香酮对照品溶液各5 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以环己烷－乙酸乙酯(20∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，在与麝香酮对照品色谱相应位置上，显相同的黄色斑点;置紫外光灯(254 nm)下检视，在与苏合香对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光淬灭斑点。再以环己烷－丙酮(20∶7)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视，在与冰片及酯蟾毒配基、华蟾蜍毒基对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照品无干扰，经验证方法可行。(见图1～3)

图1　日光下检视(鉴别人工麝香)Fig.1　The Sun Review(To identify artificial musk)

图2　UV(254 nm)下检视(鉴别苏合香)Fig.2　UV(254nm)Review(To identify storax)

图3　喷5%香草醛后(鉴别蟾蜍、冰片)Fig.3　After Spraying 5%Vanillin(To identify toad，borneol)

2.2人工牛黄、人参的薄层鉴别

2.2.1供试品溶液的制备取上述备用滤渣，挥干二氯甲烷，加甲醇10 mL，超声处理20 min，滤过，滤液作为供试品溶液。

2.2.2对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品，加甲醇制成每1 mL分别含1 mg的对照品混合溶液。再取人工牛黄对照药材，加甲醇制成每1 mL含3 mg的对照药材溶液。

2.2.3阴性对照品溶液的制备(所用药材由生产单位提供)分别取处方中各药味(除人参、人工牛黄) 1/100处方量，模拟制法，分别制备缺人参、人工牛黄的对照溶液，按供试品溶液的制备方法制备，即得。

2.2.4薄层层析吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷－甲醇－水(13∶6∶2)下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，在与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及人参皂苷Re对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点;置紫外光灯(365 nm)下检视，在与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及人参皂苷Re对照品及人工牛黄对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰，经验证方法可行。(见图4～5)

图4　日光下检视Fig.4　The Sun Review

图5　UV365 nm下检视Fig.5　The UV365nm Review

3　讨论

将处方中4味药材的薄层鉴别合并，以1块薄层板、2种展开系统，同时鉴别人工麝香、蟾蜍、苏合香、冰片4种药材;将处方中人参、人工牛黄的薄层鉴别合并，以1块薄层板、1种展开系统，同时鉴别人参、人工牛黄2种药材，为本药品的快速鉴别参考提供了依据。

根据药材中有效成分的性质，经过摸索确定了提取方法。人工麝香、蟾蜍、苏合香、冰片4味药材的有效成分均为脂溶性成分，且容易挥发，曾选择乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯为提取溶剂，因蟾蜍中的成分不溶于乙醚，三氯甲烷毒性大，故选择毒性相对小、对四味药材的有效成分溶解性均好、沸点低、容易挥干的二氯甲烷作为最佳提取溶剂。二氯甲烷沸点低，故选择在冰水浴中超声处理。

处方中冰片的量大，故超声提取后的溶液先取出1 mL作为冰片的供试品溶液。其余溶液室温挥至近干后，加乙酸乙酯1 mL溶解后转移至具塞试管中，加1 mL二硝基苯肼试液，原理为使样品中的麝香酮与二硝基苯肼试液反应生成黄色苯腙类化合物，以便麝香酮的检出，因为如果二氯甲烷提取液直接点样展开后，需喷二硝基苯肼试液才能检出，喷二硝基苯肼试液后薄层板背景为黄色，不仅降低了麝香酮检出灵敏度，也阻碍了蟾蜍、苏合香、冰片的同时检出。故选择先使得麝香酮与二硝基苯肼试液反应生成黄色苯腙类化合物，苯腙类化合物能溶于乙酸乙酯，蟾蜍、苏合香、冰片的成分也能溶于乙酸乙酯，且乙酸乙酯液在上层，点样也容易。实验证明，这样制备的供试品溶液，既能很好地检出麝香酮，又不影响其他成分的同时检出。

人参所含有的人参皂苷为水溶性成分，人工牛黄的部分有效成分也为水溶性成分，故将第1个薄层项下二氯甲烷提取后的滤渣，加甲醇超声提取后作为鉴别人参及人工牛黄的供试品溶液。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010年版一部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010.

［2］罗心平，施海明.麝香保心丸的基础与临床［J］.中国中西医结合杂志，2002，22(9):718-720.

［3］蒋艳玲，袁卫梅，李宇翠.薄层扫描法测定麝香保心丸中麝香酮的含量［J］.河南中医药学刊，2002，17(4):21.

本文编辑:王知平

Study on TLC of Shexiangbaoxin PiLL by MuLti-Components Assay

WANG Aina，CUI Yuhong
(Shanxi Provincial Institute For Food and Drug Inspection，Taiyuan 030001，Shanxi，China)

Objective:To establish a TLC(thin-layer-chromatography)method in shexiangbaoxin piLL by multicomponents assay.Methods:Two TLC methods were used to identify the quality control standard of six ingredients of medical herbs instead of the current 6 individual TLC.Results:All spots of TLC were clear;the separation effect was good;there was no interference in the negative control.ConcLusion:The method is simple，easy to practise，and repeatable so that it can be used for quick test of shexiangbaoxin pill.

Shexiang Baoxin pill;Multi-components Assay;TLC

R917

A

1671-0126(2016)02-0001-03

王爱娜，女，主管药师，从事中药检验及质量标准研究