封云涛, 郭晓君, 刘中芳, 张润祥,庾 琴, 史高川, 范仁俊*

(1. 山西省农业科学院植物保护研究所, 农业有害生物综合治理山西省重点实验室,太原 030031; 2. 山西省农业科学院棉花研究所, 运城 044000)



山西省苹果园山楂叶螨对5种杀虫剂抗药性监测

封云涛1, 郭晓君1, 刘中芳1, 张润祥1,庾 琴1, 史高川2, 范仁俊1*

(1. 山西省农业科学院植物保护研究所, 农业有害生物综合治理山西省重点实验室,太原 030031; 2. 山西省农业科学院棉花研究所, 运城 044000)

为了明确山西省苹果园山楂叶螨(AmphitetranychusviennensisZacher)对化学杀虫剂的抗性现状及发展趋势,本文采用玻片浸渍法建立了山楂叶螨相对敏感种群对5种杀虫剂的敏感基线,连续3年(2013-2015年)监测了采自山西省苹果主产区运城苹果园的山楂叶螨对5种杀虫剂的抗性水平及变化动态。监测结果表明:田间监测种群对阿维菌素和三唑锡均处于敏感性下降及低水平抗性阶段,对哒螨灵和噻螨酮的抗性由低水平抗性升至中等水平抗性,对炔螨特处于低水平抗性。田间防治山楂叶螨时,哒螨灵与噻螨酮应淘汰不再使用,阿维菌素、三唑锡、炔螨特则应注意减少用药量及轮换用药,以延缓产生更高水平的抗药性。

山楂叶螨; 苹果园; 敏感基线; 抗性监测

山楂叶螨(AmphitetranychusviennensisZacher)[1],又名山楂红蜘蛛,是我国落叶果树上普遍发生的重要害螨之一[2],该害螨以成螨、若螨聚集在叶背面刺吸为害,受害叶片出现失绿小斑点,随后扩大成片,严重时叶背变为褐色,甚至枯焦脱落[3]。多年来对其主要以化学防治为主,由于长期大量频繁使用化学农药,致使山楂叶螨早在20世纪60-80年代就对内吸磷和对硫磷等多种药剂产生了抗药性[4-6]。近年来,山楂叶螨在山西省及全国多省发生严重[7-10],因此,有必要明确其对近年来生产上常用杀虫剂的抗性程度,以便指导生产上合理选用农药。

敏感毒力基线是获得某个敏感纯合子的昆虫种群对某种杀虫剂的毒力回归线[11]。害虫抗药性监测是指导杀虫药剂合理使用的重要依据,也是害虫抗药性研究中最基本的工作,任何一种抗性监测方法都必须首先建立敏感毒力基线,作为一个参比的标准[12]。基于此,本文应用玻片浸渍法建立了山楂叶螨对5种杀虫剂的相对敏感毒力基线,并以此为标准,连续3年监测了山西省运城地区苹果园山楂叶螨的抗性水平及变化动态,为抗性的早期预警及制定相应的农药科学使用策略和抗性治理工作提供依据。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

所用药剂均为原药:90.0%炔螨特(propargite, 湖北仙隆化工股份有限公司)、96.9%哒螨灵(pyridaben,山东联合化工股份有限公司)、98.3%噻螨酮(hexythiazox, 江苏常隆化工有限公司)、96.4%三唑锡(azocyclotin, 浙江华兴化学农药有限公司)、96.2%阿维菌素(abamectin, 河北威远化工有限公司)。

1.2 供试种群

相对敏感种群:于2013年6月采自山东省果树研究所苹果树上,未曾接触过药剂,在室内用海棠叶片和嫩枝继代饲养至今。饲养条件为温度(25±1)℃,相对湿度65%～85%,光周期L∥D=16 h∥8 h。

田间种群:于2013年-2015年,每年6月-7月自山西省运城市临猗县北景乡西里村苹果树上采集,在室内用海棠叶片饲养1～2代后进行室内毒力测定。

试虫来源地山西省运城市处于我国西北黄土高原苹果优势产业带上,临猗县曾被列为国家苹果生产重点县。根据研究者的调查,运城地区苹果园一个生长季平均用药8～9次,每667 m2用药总量达到5 kg,农户普遍用药量达到规定要求的2 倍以上,其中杀螨剂历史上用药量较多的为噻螨酮和哒螨灵,近几年使用较多的为阿维菌素、炔螨特、三唑锡,如:阿维菌素一个生长季用药2～4次,用药量3 000～4 000倍;炔螨特一个生长季用药2次,用药量1 500～2 000倍。

1.3 成螨的毒力测定

参照联合国粮农组织推荐的玻片浸渍法(slide-dip method)进行[13]。将双面胶带剪成2～3 cm长,贴在载玻片的一端,用镊子揭去双面胶带上的纸片,用零号毛笔挑选大小一致、体色鲜艳、行动活泼的雌成螨,将其背部粘在双面胶带上,不要粘住螨足、螨须和口器,每片胶带粘3～4行,每行大约粘1～20头叶螨。在温度为(26±1)℃、光周期L∥D=16 h∥8 h、相对湿度60%的光照培养箱中放置4 h后,用Olympus双目解剖镜观察,严格剔除死亡或不太活泼以及体位不合适的叶螨个体。各药剂原药用丙酮溶解稀释成不同浓度的母液,再用蒸馏水稀释为供试浓度,先进行预备试验,在预备试验的基础上再稀释5～7个浓度,将带螨玻片的一端浸入药液中,轻轻摇动5 s后取出,迅速用吸水纸吸干螨体及其周围多余的药液。在白色瓷盘内铺一层湿润纱布,浸过药液的玻片放置于大瓷盘内,在白色瓷盘上面再覆盖一层湿润纱布以达到保湿的效果。以带螨玻片浸渍清水作为对照,每个处理重复3～4次。24 h后在解剖镜下检查结果,分别记录存活和死亡的叶螨数量。用毛笔轻触螨体,以螨足不动者为死亡,对照处理死亡率在10%以下为有效试验。

1.4 数据分析

试验数据根据Probit几率值分析法计算毒力回归方程、LC50及95%置信限等。以各杀虫剂的LC50与相对敏感种群毒力基线的LC50进行比较,计算抗性倍数(resistance ratio)。抗性水平按照沈晋良和吴益东报道的标准[14]划分为敏感(RR<3),敏感性下降(3≤RR<5),低水平抗性(5≤RR<10),中等水平抗性(10≤RR<40),高水平抗性(40≤RR<160)和极高水平抗性(RR≥160)。

2 结果与分析

2.1 山楂叶螨相对敏感种群对5种杀虫剂的敏感基线

通过测定5种杀虫剂对山楂叶螨相对敏感种群的毒力,表明山楂叶螨对阿维菌素的敏感性最高,LC50为0.075 mg/L,对哒螨灵的敏感性次之,LC50为0.28 mg/L,对炔螨特和噻螨酮的LC50分别为24.9 mg/L和26.03 mg/L;对三唑锡敏感性最低,LC50为42.97 mg/L(表1)。

2.2 山楂叶螨运城种群对5种杀虫剂的抗性水平

2013年-2015年,山西省运城地区山楂叶螨田间种群对5种杀虫剂抗性监测结果如表2 所示。连续3年的监测数据表明,阿维菌素和三唑锡处于敏感性下降及产生低水平抗性阶段,阿维菌素的抗性倍数由2013年的1.27倍,上升至2014年的3.07倍和2015年的5.60倍,三唑锡的抗性倍数由2013年的1.69倍,上升至2014年的5.89倍和2015年的5.84倍;哒螨灵和噻螨酮的抗性则由低水平抗性升至中等水平抗性,哒螨灵抗性倍数由2013年的5.44倍分别上升至10.92倍(2014年)和14.18倍(2015年),噻螨酮的抗性由2013年的5.52倍分别上升至7.98倍(2014年)和16.04倍(2015年);炔螨特处于低水平抗性,3年监测的抗性倍数介于8.00～9.44倍之间。

表1 山楂叶螨相对敏感种群对5种杀虫剂的敏感基线

表2 2013-2015年山楂叶螨运城种群对5种杀虫剂的抗性水平

3 结论与讨论

本研究利用山楂叶螨相对敏感种群建立了对5种杀虫剂的敏感基线,结果表明,山楂叶螨对阿维菌素的敏感性最高,对三唑锡的敏感性最低。以测定的敏感基线为标准,连续3年对山西省运城地区苹果园山楂叶螨的抗性监测表明,5种杀虫剂中阿维菌素与三唑锡处于敏感性下降及产生低水平抗性阶段,哒螨灵与噻螨酮由低水平抗性升至中等水平抗性,炔螨特3年均处于低水平抗性阶段。因此,田间防治时,哒螨灵与噻螨酮应淘汰不再使用;阿维菌素、三唑锡、炔螨特则应注意减少用药量及轮换用药,以延缓产生更高的抗药性。

刘慧萍[15]2005年报道山西运城种群对哒螨灵产生了低水平抗性,本研究中监测表明哒螨灵已经产生了中等水平抗性;刘金香等[16]2004年测定结果表明,山西运城种群对阿维菌素和三唑锡仍处于相对敏感阶段,本研究与之相比,虽然阿维菌素和三唑锡仍处于敏感性下降阶段,但是致死中浓度LC50却远远大于刘金香等[16]测定的0.01 mg/L和81.59 mg/L,这些研究都表明了随着用药时间的增加,运城地区山楂叶螨种群与10年前相比,敏感性下降了很多,这与运城地区用药历史长,用药水平高的情况相一致。

彭丽娟等[17]2015年报道陕西苹果园山楂叶螨各田间种群对哒螨灵产生了13.29～69.63倍的中等至高水平抗性,对阿维菌素，多数田间种群尚处于敏感性下降阶段;本研究监测结果显示,运城种群对哒螨灵的抗性已由低水平抗性升至中等水平抗性,抗性最高达到14.18倍,对阿维菌素的抗性由2013年的1.27倍,上升至2014年的3.07倍和2015年的5.60倍,敏感性也处于下降阶段,虽然两种药剂的整体抗性水平与彭丽娟等2015年报道的结果类似,但由于抗性倍数来自于不同的敏感基线,因此,仍不能比较出不同地区或不同省份的山楂叶螨对同一药剂的抗性水平,如果以彭丽娟等2015年报道中的哒螨灵、阿维菌素基线中LC50为标准,本研究中的运城种群对哒螨灵的抗性则全部为高水平及极高水平抗性,而阿维菌素也处于中等或高水平抗性。王洪涛等[18]2012年监测发现山东省11个地区的苹果全爪螨中有部分地区种群已经对阿维菌素、哒螨灵、炔螨特和三唑锡产生了不同程度的抗药性。

阿维菌素、哒螨灵、三唑锡和炔螨特是近些年来生产上大量使用的杀螨剂,在山西、陕西、山东等苹果产区都有一定的用药历史,长期用药势必导致害螨敏感性下降,抗药性产生。因此,在今后的防治中,加强统一连续性的抗性监测尤为重要,根据抗性监测结果,合理使用各类农药,不仅能延缓害螨的抗药性产生,还能减少农药使用量。

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(责任编辑:杨明丽)

Resistance of Amphitetranychus viennensis Zacher to five insecticides in apple orchards in Shanxi Province

Feng Yuntao1, Guo Xiaojun1, Liu Zhongfang1, Zhang Runxiang1,Yu Qin1, Shi Gaochuan2, Fan Renjun1

(1.Institute of Plant Protection, Shanxi Academy of Agricultural Sciences, Shanxi Key Laboratory of Integrated Pest Management in Agriculture, Taiyuan 030031, China; 2. Institute of Cotton Research, Shanxi Academy of Agricultural Sciences, Yuncheng 044000, China)

In order to define the resistance levels ofAmphitetranychusviennensisZacher to the predominantly used insecticides, the field populations were collected from Shanxi Yuncheng apple orchards from 2013 to 2015, and the slide-dip method was applied to establish the baseline susceptibility and monitor the resistance ofA.viennensisfield populations to five insecticides. The field populations had a decline susceptibility and low level of resistance to abamectin and azocyclotin, and low to moderate resistance to pyridaben and hexythiazox, and low resistance to propargite. Theses results suggested that in order to slow down resistance development ofA.viennensisin this region, pyridaben and hexythiazox should be stopped using, abamectin, azocyclotin and propargite should be reduced and rotated with other insecticides.

Amphitetranychusviennensis; apple orchard; baseline susceptibility; resistance monitoring

2016-01-13

2016-02-29

公益性行业(农业)科研专项(201203038)

S 436.611

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2016.06.034

致 谢：感谢山东省果树研究所孙瑞红研究员馈赠山楂叶螨相对敏感种群。

* 通信作者 E-mail:rjfan@163.com