杨美平

河北平山县人民医院重症医学科 平山 050400



重型颅脑损伤并发急性肾损伤患者NGAL和CysC水平变化及诊断价值

杨美平

河北平山县人民医院重症医学科 平山 050400

目的 研究重型颅脑损伤并发急性肾损伤(AKI)患者中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和血清胱抑素C(CysC)水平的变化及诊断意义。方法 选取我院76例重型颅脑损伤合并AKI患者，采用双夹心抗体ABC-ELISA法检测NGAL，免疫散射比浊法检测CysC，并与正常体检者进行比较，同时分析不同分期急性肾损伤患者及不同生存结局患者NGAL和CysC水平。结果 AKI患者NGAL、CysC水平均显著高于正常组，随分期上升均呈递增趋势，各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)；76例中死亡18例，存活58例，死亡患者NGAL、CysC水平分别为(1.52±0.51)μg/L、(2.96±0.92)mg/L，显著高于存活患者的(3.95±1.10)μg/L、(5.87±2.03)mg/L。结论 重型颅脑损伤患者NGAL和CysC表现为异常上升，且随AKI分期发生改变，可作为预后的预测因子。

NGAL；CysC；重型颅脑损伤；急性肾损伤

重型脑损伤为临床常见急危重症，致死率达30%～60%[1]，除颅内损伤本身伤情外，其并发急性肾损伤、全身感染或多器官功能障碍综合征等同为影响预后的危险因素。重型颅脑损伤合并AKI患者诊断难度较高，以往认为血清肌酐及尿量可靠性较高，但重型颅脑损伤患者受非肾性因素影响较大，如手术、药物等，因此，上述指标特异性降低，急需寻求更为准确的诊断指标[2]。近年发现的几种AKI生物标志物用于诊断急性肾损伤的效果已得到认可，主要包括CysC与NGAL，为研究两者在重型颅脑损伤合并AKI中诊断的可行性，本次研究对我院76例患者进行相关检验，现报告如下。

1 资料与方法

1．1 一般资料 选取我院2011-08—2014-11收治的76例重型颅脑损伤合AKI患者为研究对象，男43例，女33例，年龄24～61(52.16±7.58)岁。另选同期正常体检者30例为正常组，男19例，女11例，年龄23～58(53.13±7.42)岁；排除合并严重感染、乙肝相关肾炎、糖尿病肾病、狼疮性肾炎及肿瘤相关肾疾病者。2组性别、年龄等基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1．2 检测方法 空腹抽取肘静脉血5 mL，保存至真空采血管内，4 000 r/min离心2 min，分离上清，于-20 ℃保存待检。NGAL检测：双夹心抗体ABC-ELISA法检测，试剂由武汉博士德公司提供。洗涤液：将20 mL洗涤液与450 mL蒸馏水相溶，配制为470 mg洗涤液；显色液：显色液A、B于使用前15 min等量混合；校准液RD5-24：校准液原液20 mL加入蒸馏水80 mL，配制为100 mL稀释液：标准品配置：加入1 000 mL蒸馏水标准品浓缩液内，配制为100 ng/mL标准品原液，后准备7个EP管，第1个管中加入100 ng/mL 100 μL原液，后将900 μL RD5-24液体加入1管内并混匀，第2管内加入第1管500 μL液体，后将500 μL RD5-24液体于2管内，重复上述操作，后配置成为10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156 ng/mL的管标准品。检测过程：在室温下将试剂盒放置15～20 min，没孔加入100 μL样品稀释液RD5-24，第1孔为空白孔，2～8孔内加入标准品，剩余孔为尿液样品，每孔内加入50 μL，将板盖上，于2～8 ℃环境内反应2 h，完成后用洗涤液将每孔洗涤4次，后使其干燥，在每孔内加入200 μL NGAL抗体结合液，将盖子盖好后2～8 ℃反应2 h，后洗涤4次，每孔内加入200 μL显色液，注意在避光室内下进行，反应30 min，每孔内加入50 μL终止液，30 min内在450 mm波长的酶标仪内读取孔内OD值，将OD作为纵坐标，标准品为横坐标做曲线图，根据OD值找出浓度范围。CysC检测：采取Behring免疫散射比浊法检测，试剂购自北京嘉鸿生物科技有限公司，严格依照说明书进行。

2 结果

2．1 不同分期AKI患者NGAL和CysC水平比较 随着AKI分期NGAL、CysC均呈递增趋势，AKI患者两项水平显著低于正常值，且不同分期AKI患者组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 不同分期AKI患者NGAL和CysC水平比较

注：与Ⅰ期比较，①P<0.05；与Ⅱ期比较，②P<0.05；与Ⅲ期比较，③P<0.05

2．2 NGAL和CysC对AKI死亡事件发生的判断 76例患者中死亡18例，存活58例；死亡患者NGAL、CysC水平显著高于存活患者。见表2。

表2 NGAL和CysC对AKI死亡事件发生的判断

3 讨论

重型颅脑损伤合并AKI近年发病率明显上升，可进展为严重肾损伤，病死率高达40%，以往多采用血肌酐等指标进行检测，但敏感性较低，且非肾因素对其水平影响较大，易出现漏诊或误诊[3]，故寻找替代指标对患者病情回归及预后有重要的临床意义。

NGAL是脂质运载蛋白家族成员，分子量25 u，以共价键结合于中性粒细胞明胶酶，通常在肝脏、结肠、肾脏中表达，但表达水平极低，如机体发生炎症或上皮细胞受损时NGAL被诱导则表达升高，多高表达于肾小管，同时可诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞凋亡，可抑制炎性细胞对肾脏组织的损伤[4-5]。动物学研究显示，微阵列基因表达谱分析检测NGAL最为稳定和及时，且NGAL诊断AKL敏感度为90%，特异性则可达到99.5%[6-7]。患者发生重症颅脑损伤或急性肾损伤时，以ELISA法检测NGAL可在血液及尿液中获得较高水平表达[8]。

CysC为半胱氨酸蛋白酶抑制物家族成员，其水平通常较为恒定，受影响因素少，如年龄、性别、炎症等均对其无明显影响，因此特异性较高。CysC经肾小球滤过，而肾小球不分泌CysC，人体只有肾脏对循环中CysC进行清除[9]。众多研究显示，肾脏出现损伤后，CysC异常改变时间较血肌酐变化更早，提前1～2 d[10]，且随损伤程度加重不断增高。因此，CysC较血肌酐在短时间内对轻、中度肾损伤的诊断价值更高[11-12]。

本次研究中重型颅脑损伤合并AKI患者NGAL及CysC水平显著高于正常组，且Ⅲ期组明显高于Ⅰ期组、Ⅱ期组，死亡患者NGAL及CysC明显高于存活患者，表示NGAL及CysC可用于评估急性肾损伤病情程度，可作为死亡预测因子。

综上，NGAL和CysC诊断重型颅脑损伤合并AKI效果显著，具有较高的临床应用价值。

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(收稿2015-10-23)

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1673-5110(2016)19-0110-03