苗立祥，荣宁宁，2，张豫超，杨肖芳，张 琴，张慧琴，蒋桂华，*

(1.浙江省农业科学院 园艺研究所，浙江 杭州 310021； 2.浙江师范大学 化学与生命科学学院，浙江 金华 321004； 3.舟山市定海区农业技术推广中心站，浙江 舟山 316000)



实时荧光定量PCR法检测草莓镶脉病毒

苗立祥1，荣宁宁1，2，张豫超1，杨肖芳1，张 琴3，张慧琴1，蒋桂华1，*

(1.浙江省农业科学院 园艺研究所，浙江 杭州 310021； 2.浙江师范大学 化学与生命科学学院，浙江 金华 321004； 3.舟山市定海区农业技术推广中心站，浙江 舟山 316000)

为了建立一种特异、灵敏、快速检测草莓镶脉病毒(Strawberryveinbandingvirus，SVBV)的SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法，根据已有的检测SVBV的引物信息，合成引物，对不同草莓品种进行PCR扩增。经过克隆、测序及序列比对得到了感染SVBV的阳性植株，利用此植株PCR扩增产物构建重组质粒作为标准品，优化了PCR反应体系，标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板浓度有良好的线性关系(R2=0.999 1)；进行了灵敏度和重复性试验，敏感性可达到101拷贝·μL-1，约为普通PCR的1 000倍，重复性好；并与常规PCR方法进行了比较，成功建立了检测SVBV的实时荧光定量PCR法。用该方法检测了部分草莓品种的DNA样品，结果表明，大部分植株都带有SVBV。该方法具有很高的灵敏性和重复性，可用来快速检测草莓植株是否感染SVBV。

草莓镶脉病毒；SYBR Green-Ⅰ；实时荧光定量PCR

目前，草莓(Fragaria×ananassaDuch.)生产上用的种苗主要以匍匐茎繁殖为主，即常将上一年的生产株作为母株进行种苗生产。这样经过多年的生产和繁育后，草莓植株很容易感染上病毒，一旦感染病毒便会世代相传，导致植株矮化，匍匐茎发生减少，果实品质变劣，产量严重下降。……