刘爱东 刘 扬 马 征

(华北理工大学附属医院病理科,河北 唐山 063000)



真核翻译起始因子3h和PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

刘爱东 刘 扬1马 征1

(华北理工大学附属医院病理科,河北 唐山 063000)

目的 检测胃腺癌组织中真核翻译起始因子(EIF)3h和PTEN的表达及其临床意义。方法 选择95例胃腺癌作为观察组，70例正常胃黏膜组织作为对照组，采用免疫组化法检测两组中EIF3h和PTEN的表达。结果 观察组中EIF3h表达的阳性率明显高于对照组，观察组中PTEN表达的阳性率明显低于对照组，观察组中EIF3h和PTEN表达的阳性率与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、脉管浸润、癌结节和Ki67增殖指数均密切相关，且EIF3h和PTEN的表达负相关，生存分析显示EIF3h和PTEN的表达与预后相关。结论 胃腺癌组织中EIF3h高表达、PTEN低表达时，对肿瘤的进展有促进作用，两者具有协同负向作用，术后联合检测EIF3h和PTEN的表达对判断胃腺癌的预后有一定价值。

胃腺癌；真核翻译起始因子3h；PTEN

近年研究显示肿瘤在发生发展过程中出现明显的基因和蛋白的异常表达〔1〕。真核翻译起始因子(EIF)3h是一个含有10～13不同亚基的大翻译起始复合物，可以使Met复合物稳定地结合到40S核糖体亚基上，引起细胞的异型增生，同时能诱导肿瘤进展〔2〕。PTEN是较为经典的抑癌基因，具有双特异性磷酸酶的活性，可以广泛作用于细胞信号通路中的信号分子，抑制肿瘤的发展〔3〕。本文探讨胃腺癌组织中EIF3h和PTEN的表达及临床意义。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选取2006年1～12月行胃腺癌根治手术后留取的蜡块组织及患者的临床资料作为观察组，纳入均符合WHO关于胃腺癌的诊断标准。观察组95例，男54例，女41例，年龄42～79〔平均(60.6±5.9)〕岁，高分化39例，中分化35例，低分化21例，患者手术前均未进行放、化疗。同时选取距肿瘤边缘>3 cm切端为正常的胃黏膜组织70例作为对照组，男39例，女31例，年龄43～76〔平均(59.5±5.8)〕岁。

1.2 免疫组化检测EIF3h和PTEN蛋白的表达 EIF3h蛋白的浓缩液购自Cell Signaling生物公司，按不同比例进行预实验，选择最佳配比浓度用于正式实验。PTEN的工作液购自北京中杉金桥生物技术有限公司。EIF3h和PTEN的检测应用免疫组化技术SP法，DAB染色，严格实验步骤，并均由同一技师操作，严格质控。

1.3 EIF3h和PTEN蛋白检测结果的判定方法 EIF3h和PTEN均以细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性细胞，每张切片选择10个400倍的高倍视野，取其平均值作为样本最终的阳性表达率，以阳性细胞≥5%定为阳性，以阳性细胞<5%定为阴性。

1.4 统计学方法 采用SAS6.12统计软件进行χ2检验、线性相关分析和生存分析。

2 结 果

2.1 观察组与对照组EIF3h和PTEN蛋白表达阳性率比较 观察组EIF3h表达的阳性率明显高于对照组(66.32% vs 12.86%，χ2=46.830 2，P<0.000 1)，PTEN表达的阳性率明显低于对照组(42.11% vs 95.71%,χ2=50.812 4，P<0.000 1)。见图1。

图1 EIF3h、PTEN在胃腺癌及正常胃黏膜组织中的表达(DAB，×200)

2.2 观察组不同临床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表达阳性率的比较 观察组中EIF3h和PTEN表达的阳性率均与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、脉管浸润、癌结节和Ki67增殖指数(图2)密切相关(P<0.05)，见表1。

2.3 观察组中EIF3h和PTEN表达的相关性 观察组中EIF3h和PTEN的表达呈负相关(r=-0.53，P=0.019 2)。

2.4 观察组中EIF3h和PTEN表达的生存分析 本组患者随访时间为7～60个月，平均24.9个月。经检验，胃腺癌组织中EIF3h和PTEN的表达均与患者预后相关(P<0.05)，即EIF3h高表达、PTEN低表达患者的预后差。见图3，图4。

表1 观察组不同临床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表达阳性率的比较〔n(%)〕

图2 Ki67在胃腺癌中阳性表达(DAB，×200)

图3 EIF3h蛋白表达与胃腺癌预后的关系

图4 PTEN蛋白表达与胃腺癌预后的关系

3 讨 论

胃腺癌病变发生和进展时细胞异常增生，同时存在复制被错误修复并表达到下一代细胞，引发肿瘤的传代基因和细胞异常表达，此时参与增殖、翻译和拮抗癌的相关基因均发生明显变化。翻译起始阶段40S核糖体在发挥功能时需要相关因子的协助，尤其是其与mRNA结合时更加必要〔4〕。有研究认为EIF3是一个含有10～13不同亚基的大翻译起始复合物，其亚基EIF3h对复合物的功能起到关键性作用，因此这些亚基称为核心亚基〔5〕。近年学者也发现EIF3h可以使Met复合物稳定地结合到40S核糖体亚基上，并有助于保存这个复合物在60S核糖体亚单位之上。当外源性刺激或有丝分裂信号刺激细胞时，mTOR结合EIF3h复合物，并且使S6K1磷酸化〔6〕。此种作用可以引起细胞的异型增生，同时能诱导肿瘤进展。有研究认为真核细胞的细胞质分子伴侣TCP-1结合到新合成的EIF3h时需正确折叠，最后的两个亚基表达特定的基因〔7〕。在肿瘤进展过程中，此种作用可以使细胞微环境发生变化，有效的促进细胞信号的转导、细胞增殖和整个翻译过程〔8〕。PTEN是一种肿瘤抑制基因，其所编码的蛋白质是一种磷酸酶。研究显示PTEN可以引发细胞内第二信使磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸(PIP3)出现去磷酸化，不仅抑制细胞的增殖，还可以抑制肿瘤的转化〔9〕。但是关于PTEN在肿瘤中的作用可能更趋于多向性，如其可能与P53的作用有关〔10〕，也可能与NEDD4-1基因和作用相关〔11〕。

本实验结果提示两种蛋白异常表达可以诱发正常细胞癌变，并引发肿瘤细胞出现异常增殖。EIF3h引发肿瘤细胞增殖、生长的功能与其调节翻译有关。也有研究认为EIF3h可以快速地诱导NIH-SH3细胞出现恶性表型〔12〕。也有学者认为EIF3h的高表达可以抑制MYC依赖的凋亡抑制过程，进而直接引起细胞的失控性增生〔13〕。而PTEN在作用过程中也可以对MYC有一定影响〔14〕。PTEN的表达一旦丢失，可以引起明显的细胞增殖作用，可以无限制地引起以Ki67阳性细胞为主细胞的增殖作用，此时肿瘤细胞失控性增生、分化障碍，进而癌变、浸润和转移。本研究提示EIF3h、PTEN两种蛋白异常表达参与胃腺癌的进展。此时肿瘤向周围浸润生长能力提高，脉管浸润的能力增强，周围形成癌结节的能力增高，并破坏神经。肿瘤细胞中EIF3h高表达、PTEN低表达意味着肿瘤呈高转移和高风险状态，细胞间的黏附作用减弱，迁移及活动能力均增强，易于种植于其他部位形成转移灶〔15,16〕。由于以上因素均为临床判断生物学行为的重要指标，因此EIF3h高表达、PTEN低表达提示不良的预后，而生存分析直接证实了此观点。因此联合检测EIF3h和PTEN的表达可以作为判定胃腺癌预后的指标。

总之，胃腺癌组织中EIF3h高表达、PTEN低表达时对肿瘤的进展有促进作用，术后检测EIF3h和PTEN的表达对判断胃腺癌的预后有一定价值。

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〔2015-03-17修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)

1 唐山职业技术学院医学校区

刘爱东(1975-)，男，医学硕士，副主任医师，副教授，主要从事肿瘤分子病理学研究。

R735.1

A

1005-9202(2016)19-4815-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.065