孙达统 王 琳 曾爱辉

(海南省人民医院肿瘤内科,海南 海口 570311)



血清胸腺嘧啶核苷激酶1水平与肺癌患者临床病理特征及预后的关系

孙达统 王 琳 曾爱辉

(海南省人民医院肿瘤内科,海南 海口 570311)

目的 探讨肺癌患者血清胸腺嘧啶核苷激酶(TK)1与肺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法 肺癌患者80例为肺癌组，取66例健康者为对照组，采用化学发光法检测TK1表达，并收集患者临床病理特征与1、3年生存情况。结果 肺癌患者中TK1阳性率为40.00%(32/80)，显著高于健康对照组的13.64%(9/66)(P<0.05)，肺癌患者TK1阳性率在性别、吸烟史、淋巴结转移及病理类型上未见统计学差异，而与远处转移及TMN分期有关(P<0.05)；肺癌TK1阳性与阴性患者在1年生存率上未见统计学差异(P>0.05)，但3年生存率阳性患者明显低于阴性患者(P<0.05)。结论 血清TK1在肺癌患者中高表达，并与患者发生远处转移及TMN分期密切相关，且预后生存率低。因此，血清TK1可作为指导肺癌临床分期及判断预后的独立预测指标。

胸腺嘧啶核苷激酶；肺癌

有研究报道胸腺嘧啶核苷激酶(TK)1在恶性肿瘤中阳性率较高，能提高肿瘤的早期诊断〔1〕。TK1与肿瘤细胞的生长增殖密切相关，是胸腺嘧啶核苷合成的关键酶之一，由于恶性肿瘤细胞DNA合成增加，TK1也随之增加，是评估细胞增殖速度的重要标志之一〔2〕。但TK1在提示肺癌患者病理特征及揭示患者预后的报道较少。本研究拟分析肺癌患者血清中TK1水平与病理特征及预后的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2012年6月至2013年6月我院收治的肺癌初治患者80例，所有患者均经病理诊断为原发性肺癌，且此前未接受过肺癌相关化疗、放疗及手术治疗；排除严重感染未控制者、怀孕或伴随其他恶性肿瘤者，男51例，女29例；平均年龄(51.43±12.74)岁。非小细胞肺癌69例(鳞癌30例，腺癌39例)，Ⅰ期28例，Ⅱ期11例，Ⅲ期5例，Ⅳ期25例；小细胞肺癌11例，其中局限3例，广泛期8例。另取入组本院体检中心健康人群66例作为健康对照组，男42例，女24例，平均年龄(50.95±13.38)岁。两组平均年龄及性别比未见统计学差异(P=0.989)。本研究已获得医院伦理委员会审批，且患者知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 TK1检测方法 抽取受试者晨起空腹全血5 ml，高速离心后取上层血清备用。将内含硝酸纤维素膜的模板平放于滤纸上，将待测血清每样品3 μl点样到标准品后面膜上，室温下自然晾干。将配置好的稀释液震荡洗膜2次，每次5 min。弃去稀释液，加入封闭液，继续震荡封闭1 h，并加入一抗(TK1-IgY)，4℃过夜。次日弃去反应液并漂洗3次后，加入二抗(生物素化抗IgY二抗)，室温下震荡40 min。弃去反应液并洗液漂洗3次后，加链霉亲和素-酶复合物并震荡1 h，然后继续弃反应液并洗涤3次。加入电化学反应发光试剂过膜浸润。最后将膜放入化学发光成像分析系统进行分析，上述步骤重复3次，取均值。采用TK1诊断试剂盒(深圳华瑞同康生物技术公司)：血清TK1>2 pmol/L定义为阳性〔3〕。

1.2.2 标本的采集与随访 收集所有患者年龄、性别、临床病理学特征等数据。肺癌早期定义为非小细胞肺癌TNM分期Ⅰ/Ⅱ期与小细胞肺癌局限期，晚期定义为非小细胞肺癌TNM分期Ⅲ/Ⅳ期及小细胞肺癌广泛期。采用电话随访方式，分别于患者诊断肺癌后1年与3年时间点进行电话随访。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0软件行χ2检验。

2 结 果

2.1 肺癌组与健康对照组TK1阳性率对比 肺癌组中TK1阳性患者32例(40.00%)，健康对照组患者中9例(13.64%)，差异有统计学意义(χ2=12.446，P=0.000)。

2.2 肺癌组患者TK1阳性与临床病理特征的关系 肺癌组患者TK1阳性率与性别、吸烟史、淋巴结转移及病理类型无明显相关(P>0.05)，而与远处转移及TMN分期有关(P<0.05)。见表1。

表1 肺癌组患者TK1阳性与临床病理特征的关系

2.3 肺癌患者TK1阳性与生存率的关系 肺癌TK1阳性患者〔20例(62.50%)〕与阴性患者〔38例(79.17)%〕1年生存率无统计学差异(P>0.05)，但3年生存率阳性患者〔13例(40.63%)〕明显低于阴性患者〔33例(68.75%)〕(P<0.05)。

3 讨 论

TK是胸腺嘧啶核苷转化成单磷酸胸腺嘧啶的关键酶〔4〕，在机体中有两种同工酶，分别是TK1和TK2，编码TK1的基因位于人染色体17号q21-22位点上，分子量为96 kD，是一个四聚体，在胎儿发育以后逐渐降低，直至成人只存在极低量的TK1〔5〕。研究证实，TK1与细胞分裂密切相关，在细胞分裂周期中，G1-S-G2期TK1含量逐步增高，直至G2期到达顶峰。因而，TK1 mRNA与TK1可称为细胞增殖的标记物〔6〕。Alegre等〔7〕研究证实在肺癌患者中，TK1是一项特异性较高的细胞增殖标记物，可一定程度上提示肺癌的发生发展，可用于辅助肺癌的诊断。Korkmaz等〔8〕发现TK1水平的高低在提示肺癌患者的预后上也具有一定临床价值〔9〕。

本研究结果进一步证实了血清TK1水平有助于临床肺癌的诊断。国外有学者研究表明：血清TK1阳性与乳腺癌患者TNM分期、肿瘤坏死、血管侵犯等密切相关，且多变量分析提示血清TK1是乳腺癌患者预后的独立指标〔9〕。在预后分析上，本研究发现虽然TK1阳性组患者与阴性组患者在3年生存率上出现统计学差异。这可能是因为TK1作为一个单磷酸胸腺嘧啶的关键酶，一定程度上提示了DNA复制和细胞增殖的活性。TK1阳性患者肺癌细胞增殖活性高于TK1阴性患者，因此远期预后较TK1阴性患者更差。Huang等〔10〕报道高TK1水平的乳腺癌患者5年生存期远低于低TK1水平的患者，且高TK1水平与肿瘤复发密切相关。结合本研究分析结果，提示血清TK1可在肺癌患者中作为判断肺癌预后的一个辅助临床指标。

1 Lopez-Martinez B，Vilchis-Ordonez A，Salazar-Garcia M，etal.Thymidine kinase：a biomarker for recently diagnosed acute leukemia in pediatric patients according to the cell line involved〔J〕.Arch Med Res，2015;46(8):630-4.

2 Ji Y，Wu XB，Chen JY，etal.Serum thymidine kinase 1 levels correlate with clinical characteristics of esophageal squamous cell carcinoma〔J〕.Int J Clin Exp Med，2015；8(8)：12850-7.

3 Chen ZH，Huang SQ，Wang Y，etal.Serological thymidine kinase 1 is a biomarker for early detection of tumours--a health screening study on 35，365 people，using a sensitive chemiluminescent dot blot assay〔J〕.Sensors(Basel)，2011；11(12)：11064-80.

4 Gatt ME，Goldschmidt N，Kalichman I，etal.Thymidine kinase levels correlate with prognosis in aggressive lymphoma and can discriminate patients with a clinical suspicion of indolent to aggressive transformation〔J〕.Anticancer Res，2015；35(5)：3019-26.

5 Timm J，Bosch-Navarrete C，Recio E，etal.Structural and kinetic characterization of thymidine kinase from leishmania major〔J〕.PLoS Negl Trop Dis，2015；9(5)：e3781.

6 Fiala O，Finek J，Buchler T，etal.The association of serum carcinoembryonic antigen，carbohydrate antigen 19-9，thymidine kinase，and tissue polypeptide specific antigen with outcomes of patients with metastatic colorectal cancer treated with bevacizumab：a retrospective study〔J〕.Target Oncol，2015；10(4)：549-55.

7 Alegre MM，Weyant MJ，Bennett DT，etal.Serum detection of thymidine kinase 1 as a means of early detection of lung cancer〔J〕.Anticancer Res，2014；34(5)：2145-51.

8 Korkmaz T，Seber S，Okutur K，etal.Serum thymidine kinase 1 levels correlates with FDG uptake and prognosis in patients with non-small cell lung cancer〔J〕.Biomarkers，2013；18(1)：88-94.

9 Nisman B，Allweis T，Kadouri L，etal.Comparison of diagnostic and prognostic performance of two assays measuring thymidine kinase 1 activity in serum of breast cancer patients〔J〕.Clin Chem Lab Med，2013；51(2)：439-47.

10 Huang ZH，Tian XS，Li R，etal.Elevated thymidine kinase 1 in serum following neoadjuvant chemotherapy predicts poor outcome for patients with locally advanced breast cancer〔J〕.Exp Ther Med，2012；3(2)：331-5.

〔2016-03-03修回〕

(编辑 袁左鸣)

孙达统(1977-)，男，硕士，主治医师，主要从事肺部恶性肿瘤临床诊治方面的研究。

R734

A

1005-9202(2016)19-4799-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.057