赵艳琴，吴元华，赵秀香，安梦楠，陈建光

1 内蒙古民族大学 / 农学院，内蒙古通辽霍林河大街 22 号 028043；2 沈阳农业大学 / 植物保护学院，辽宁沈阳市东陵路 120 号 110866

应用Taqman探针实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病菌Rhizoctonia solaniAG-3 方法的建立

赵艳琴1，吴元华2，赵秀香2，安梦楠2，陈建光2

1 内蒙古民族大学 / 农学院，内蒙古通辽霍林河大街 22 号 028043；2 沈阳农业大学 / 植物保护学院，辽宁沈阳市东陵路 120 号 110866

分别基于7个烟草靶斑病菌株基因组中ITS-5.8S rDNA序列设计引物和探针; 并对引物及探针特异性进行验证; 建立检测体系并对接种烟草靶斑病菌的叶片和土壤中的烟草靶斑病菌进行检测。结果表明：所设计的引物及探针对R.solaniAG-3 具有特异性，检测体系可以检测出烟草叶片及土壤样品中的烟草靶斑病菌。接种烟草叶片的检测表明, 接种后6h就可检测到强致病力菌株YC-9，12h后能检测到弱致病力菌株LF-2；获得了烟草靶斑病菌DNA质量的对数与添加菌丝量的对数之间的回归曲线方程，对不同月份土壤样品的测定结果表明烟草靶斑病菌在土壤中呈周年动态变化趋势。

烟草靶斑病菌；AG-3；实时荧光定量PCR；烟草

烟草靶斑病（Rhizoctonia solanikühn）近年来在我国烟草旺长期和成熟期大面积发生，因其潜育期短、流行性强的特点，对烟叶的产量和品质造成严重的影响[1-2]。其病原菌R. solani是一种土壤习居菌，可以通过土壤中的菌核进行土壤传播，其有性态瓜亡隔菌（Thanatephorus cucumeris(Frank) Donk）也可以通过形成的大量担孢子进行气流传播，因此对在烟草叶片及土壤中的烟草靶斑病菌进行定量检测和监测对防治该病害具有重要意义。……