薛金英

（山东省诸城市畜牧兽医管理局山东潍坊262200）

酶联免疫吸附法（ELISA）检测鸡肉中氯霉素

薛金英

（山东省诸城市畜牧兽医管理局山东潍坊262200）

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种广谱抗生素。具有良好的抗菌效果且价格低廉，广泛应用于家禽的各种传染性疾病的治疗。但是氯霉素对造血系统有严重不良反应，主要是抑制骨髓造血机能。因此，找到一种快速、简便而又准确的检测方法成为了业界十分关注的课题。传统上常用HPLC与TLC来作为抗生素检测的方法，但效率低、灵敏度也达不到要求。酶联免疫吸附法经笔者实践证明，操作简便、试验过程短、检测样品多，特异性高，且检测灵敏度最低可达0.01μg/L。

ELISA；鸡肉；氯霉素

1　试验原理

采用直接竞争ELISA法检测样品中的氯霉素。包被抗原与加入的标准品或待测样品竞争抗体，加入酶标记物，酶标记物与抗体结合。通过洗涤除去游离的抗原、抗体及抗原抗体复合物。加入底物液，使结合到板上酶标记物将底物转化为有色产物。加入终止液，在450 nm处测定吸光度值与试样中氯霉素的自然对数成反比。

2　实验仪器材料

1）仪器耗材:微孔板酶标仪（450 nm）、电子天平、振荡器、均质机、离心机、氮吹仪、离心管和玻璃试管、可调式5 μL～50 μL、20 μL～200 μL和100 μL～1000 μL微量移液器、拍板纸。

2）试剂：乙酸乙酯（分析纯）、正己烷（分析纯）、去离子水或蒸馏水。

3）检测试剂盒组成：包有氯霉素抗体的微孔板、氯霉素标准品溶液（0号：0μg/L；1号：0.02μg/L；2号：0.06μg/L；3号：0.18μg/L；4号：0.36μg/L；5号：0.72μg/L）、20×浓缩洗涤液、10×浓缩样品复溶液、5×氯霉素标记HRP溶液、底物A溶液、底物B溶液、终止液、封板膜。……