邓立方，朱友明，王银龙

HIF-1α基因介导的牙髓干细胞在体外的成血管作用

邓立方，朱友明，王银龙

目的 探索低氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因诱导牙髓干细胞（DPSCs）在体外的成血管作用。方法 对HIF-1α进行基因突变，构建突变型、野生型以及对照组的慢病毒载体；体外培养DPSCs；分别用3种慢病毒转染DPSCs后，检测细胞转染效率、目的基因HIF-1α在mRNA及蛋白水平的表达，MTT法检测慢病毒载体对细胞增殖的影响；目的基因转染成功后，qPCR、Western blot法检测HIF-1α调控DPSCs成血管因子的表达。结果 MTT结果表明慢病毒载体对DPSCs的增殖几乎无影响。qPCR和Western blot法检测目的基因HIF-1α成功表达，HIF-1α能够显著上调DPSCs的成血管因子的表达（P＜0.05）。突变组和野生组的成血管作用明显强于对照组（P＜0.05），而突变组又优于野生组（P＜0.05）。结论 HIF-1α基因可以促进DPSCs血管向分化作用。

HIF-1α；DPSCs；慢病毒转染；成血管

牙髓干细胞（dental pulp stem cells，DPSCs）有很强的增殖能力和多向分化的潜能，随着基因工程和组织工程技术的发展，DPSCs越来越多地被用作修复受损组织或器官的转基因靶细胞［1］。低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）是HIF-1的活性单位，调控数百种基因的转录活性，涉及骨髓源性血管细胞生成、血管反应、动脉血管形成等［2］。HIF-1α蛋白稳定性和转录活性均受细胞内氧浓度的调节［3］，为了使其在常氧状态下实现稳定表达并且能够保持高度活性，对HIF-1α基因进行抗降解突变和保持活性突变［4］。研究［5］表明血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）可以显著增强DPSCs成血管的活性，而HIF-1α作为VEGF的上游靶基因，其在诱导DPSCs成血管作用方面具有更大的优势。骨修复和再生

中，血管与骨形成是相辅相成不可分开的，HIF-1α是此生物学过程中必需的关键性因子［6］。……