环耙明对M1型巨噬细胞分泌iNOS的影响
2016-11-15叶家宝徐晓军孟晓明
叶家宝,李 俊,徐晓军,黄 成,孟晓明
◇药学研究◇
环耙明对M1型巨噬细胞分泌iNOS的影响
叶家宝,李 俊,徐晓军,黄 成,孟晓明
目的 研究环耙明在巨噬细胞极化过程中的作用。方法 用100 ng/ml脂多糖(LPS)和20 ng/ml干扰素γ(IFN-γ)处理RAW264.7 24 h刺激成M1型巨噬细胞,用20 ng/ml白介素-4(IL-4)处理RAW264.7 24 h刺激成M2型巨噬细胞,用荧光定量PCR(QPCR)法检测各分型中一氧化氮合成酶(iNOS)、CD86、精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206、GLi1、ptch1 mRNA水平的表达;用QPCR法、Western blot法、免疫荧光法检测加入环耙明后对M1型巨噬细胞分泌iNOS的影响。结果 M1型巨噬细胞高分泌iNOS、CD86、M2型巨噬细胞高分泌Arg-1、CD206(P<0.01);40 nmol/L环耙明刺激后,M1型巨噬细胞中ptch1 mRNA水平的表达明显增强且在100 nmol/L时达到最大值(P<0.01);经环耙明1 000 nmol/L刺激后有效降低了iNOS的mRNA和蛋白水平,可能提示环耙明会促进巨噬细胞向M2型巨噬细胞分化。结论环耙明能够明显地降低M1型巨噬细胞中iNOS的分泌。
环耙明;巨噬细胞;RAW264.7;一氧化氮合成酶
巨噬细胞是机体重要的免疫细胞之一,通过免疫监视、免疫清除,清除病原体,维护内环境的稳态[1]。在这个过程中,巨噬细胞可在不同的生理病理状况下表现出不同的表型以调控炎症反应,即定义为不同的极化状态。研究[2]显示,巨噬细胞极化与炎症相关疾病的发生发展有着密切关系,例如类风湿性关节炎、细菌和寄生虫感染等。进一步的研究[3]表明,巨噬细胞极化过程受到多种信号分子的调控。其中NF-κB是巨噬细胞向M1极化过程中的关键分子。寻找内源性NF-κB的调控信号分子,影响巨噬细胞极化,在疾病的防治过程中有重要的作用。研究[4]表明多种通路可调控NF-κB,Hedgehog信号通路可通过调控NF-κB在胰腺癌等疾病中发挥重要作用。……
