柠檬醛调控突变型p53基因和AIF基因表达诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡
2016-11-11王亚萍吴中惠侯小芳夏海龙
王亚萍,王 娟,吴中惠,张 慧,侯小芳,宋 琴,夏海龙
柠檬醛调控突变型p53基因和AIF基因表达诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡
王亚萍1,王 娟1,吴中惠1,张 慧1,侯小芳1,宋 琴2,夏海龙1
目的 探讨柠檬醛诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡的分子机制。方法 用不同浓度的柠檬醛处理NB4细胞48 h,通过实时荧光定量PCR(qPCR)法检测突变型p53(mtp53)基因和凋亡诱导因子AIF基因的mRNA表达变化。结果 柠檬醛实验组与空白对照组比较,mtp53基因表达量减低(P<0.05);柠檬醛实验组与空白对照组比较,AIF基因表达量增加(P<0.05);乙醇对照组与空白对照组比较,mtp53和AIF的mRNA表达量无明显差异;随着柠檬醛浓度(5、10、20 mg/L)的递增,mtp53 mRNA表达量逐渐下降,AIF mRNA的表达量逐渐上升,mtp53、AIF在不同浓度柠檬醛实验组表达量差异有统计学意义(P<0.05)。结论
柠檬醛;白血病;急性早幼粒细胞白血病细胞株;p53;凋亡诱导因子
山苍子油的主要成分柠檬醛,不仅可作为香料和食品添加剂,还有抗菌、抑菌、平喘等多种作用。研究[1-3]表明柠檬醛可诱导多种肿瘤细胞如A549、RAW264.7、HL-60、U937、MCF-7等的凋亡,且对人正常胸腺细胞和脾细胞无毒性作用。研究[4-5]表明柠檬醛可以通过激活内源性线粒体途径,抑制核因子NF-κB的表达,诱导急性早幼粒细胞白血病(acutepromyelocyticleukemia,APL)细胞株NB4的凋亡,但具体机制尚不明确。该研究旨在通过研究柠檬醛诱导NB4细胞凋亡过程中突变型p53(mtp53)基因、凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)基因表达的变化,进一步探讨柠檬醛诱导NB4细胞凋亡的可能分子机制。
1 材料与方法
1.1 试剂 胎牛血清、RPMI 1640购自美国Gibco公司;柠檬醛购自美国Sigma公司,纯度>95%,用乙醇溶解备用;……
