鸡α干扰素的原核表达及纯化
2016-11-11吴斯宇孙超崔进冯赛祥黄健妮王念晨曲楠楠廖明焦培荣
中国兽医杂志 2016年8期
吴斯宇,孙超,崔进,冯赛祥,黄健妮,王念晨,曲楠楠,廖明,焦培荣
(1.华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室农业部兽用疫苗创制重点实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广东广州510642;2.君拓价值投资公司,美国新泽西州08542;3.北京利昂盛生物技术有限公司,北京海淀100094)
鸡α干扰素的原核表达及纯化
吴斯宇1,孙超2,3,崔进1,冯赛祥1,黄健妮1,王念晨1,曲楠楠1,廖明1,焦培荣1
(1.华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室农业部兽用疫苗创制重点实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广东广州510642;2.君拓价值投资公司,美国新泽西州08542;3.北京利昂盛生物技术有限公司,北京海淀100094)
根据大肠杆菌密码子的偏好性对GenBank中发表的鸡α干扰素基因序列进行了密码子优化,全基因合成了鸡α干扰素基因片段486 bp。构建原核表达质粒pET-23b-ChIFN-α。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,表达产物主要以包涵体形式存在,包涵体进行变性、复性和镍柱亲和纯化。表达产物经SDS-PAGE、Western-Blot分析表明,ChIFN-α蛋白得到了高效表达,其蛋白分子质量约19 kD,经镍柱亲和纯化后获得了高纯度的重组鸡α干扰素蛋白,其含量为0.82 mg/mL。本研究为鸡α干扰素的生物学活性分析和临床产品研发奠定了基础。
鸡α干扰素;原核表达;蛋白纯化
根据大肠杆菌密码子的偏好性对GenBank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化,人工合成该鸡干扰素基因。……
登录APP查看全文
