王彬，李淑芹，李晓齐，曹红，王永强，郑世军

（中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室，北京海淀100193）

传染性囊病病毒（IBDV）VP3蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

王彬，李淑芹，李晓齐，曹红，王永强，郑世军

（中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室，北京海淀100193）

为制备抗IBDV VP3蛋白的单克隆抗体，以VP3-His蛋白免疫BALB/c小鼠，经4次免疫、融合、亚克隆，筛选出1株能够稳定分泌抗VP3蛋白单克隆抗体的细胞株，命名为4H8F7C10。经间接ELISA方法检测，小鼠的腹水效价为2.05× 106，单克隆抗体的解离常数（kD）为9.67×10-8，此株抗体亚类为IgG3。通过Western Blot和间接免疫荧光试验检测，该株单克隆抗体可以识别IBDV感染DF-1细胞产生的VP3蛋白。初步确定此株单克隆抗体的抗原识别区位于VP3蛋白N端的第50-90位氨基酸。此株单克隆抗体的制备为IBDV临床检测方法的建立以及致病分子机制的研究奠定了基础。

IBDV；单克隆抗体；VP3蛋白

传染性囊病（IBD），是一种危害3～8周龄雏鸡的烈性、高度接触性传染病，主要侵害腔上囊等淋巴组织。腔上囊的损伤导致免疫抑制，使其他疾病的发生率明显升高。IBD往往为突然暴发，死亡率高达20%～30%，并经常发展为隐性感染。IBD在全世界范围内广泛传播。

传染性囊病病毒（IBDV）属于双RNA病毒科双RNA病毒属，无囊膜的病毒。该病毒基因组由A、B两个片段组成［1］。IBDV B片段大约为2 800 bp，编码VP1蛋白，该蛋白为病毒的RNA聚合酶；A片段大约为3 200 bp，由两个重叠的开放阅读框构成，较大的ORF编码pVP2-VP3-VP4多聚蛋白前体，该蛋白前体由VP4蛋白剪切为pVP2、VP3和VP4三个蛋白［2］，pVP2被进一步剪切成VP2和若干个短肽，较小的ORF编码病毒的非结构蛋白VP5［3］。……