程晋龙，刘蒙蒙，胡楠，张国中

（1.中国农业大学动物医学院，北京海淀100193；2.北京市畜牧总站，北京朝阳100107）

ClassⅠ新城疫病毒BJ 1株微基因组的构建及功能鉴定

程晋龙1，刘蒙蒙1，胡楠2，张国中1

（1.中国农业大学动物医学院，北京海淀100193；2.北京市畜牧总站，北京朝阳100107）

将以绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因的ClassⅠ类新城疫病毒（NDV）BJ1株微基因组质粒pOK-M和3个辅助蛋白表达质粒pCI-NP、pCI-P、pCI-L共转染BSR T7/5细胞，转染24 h即可见到明显的绿色荧光，表明微基因组及其3种辅助质粒均获得了表达，并具有各自的生物学功能，为进一步建立该毒株的反向遗传操作系统奠定了基础。

新城疫病毒；ClassⅠ；微基因组；反向遗传；辅助质粒

新城疫病毒（NDV）为副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒亚科（Paramyxovirinae）、禽腮腺炎病毒属（Rubulavirus）成员，是禽Ⅰ型副黏病毒的代表株。病毒核酸为单股负链RNA，根据基因组长度NDV分为ClassⅠ和ClassⅡ两类［1］，其中ClassⅠ型NDV基因组长15 198 nt［2］，广泛存在于野鸟和家禽中，多为无致病性或致病性较弱的毒株；ClassⅡ类NDV基因组包括两种长度：15 186 nt或15 192 nt［3］，其中既包括强毒株也包括弱毒株。因为鸡群暴发的致死性新城疫通常是由ClassⅡNDV中的强毒株引起［4-5］，所以人们对ClassⅡNDV研究较早。ClassⅠ类NDV因其通常没有致病性所以研究较少，但该类病毒在各种鸟类中广泛存在。有研究表明，ClassⅠ类NDV在传代过程中毒力有增强的可能性［6］，因此该类NDV对养禽业有潜在的威胁。

NDV的微基因组是包含了病毒全长基因组3′和5′末端UTR（非编码区）序列，并用反向互补的EGFP（绿色荧光蛋白）替代其间的编码区序列所构成的一种缺损病毒，因其需要辅助蛋白的帮助才能完成编码区蛋白（EGFP）的表达，所以人们往往把其作为检测辅助质粒的重要工具。……