陕西省人民医院(西安710068)

李连香 于翠革 陈丽宏 杨晓梅



miR-99b在新辅助化疗宫颈癌组织中的表达*

陕西省人民医院(西安710068)

李连香 于翠革 陈丽宏 杨晓梅

目的：研究miRNA-99b(miR-99b)在新辅助化疗宫颈癌组织中的表达。方法：宫颈癌患者55例分别于新辅助化疗前后收集肿瘤组织标本行micRNA的提取、反转录、实时定量PCR检测miR-99b的表达。结果：宫颈癌新辅助化疗后miRNA99b表达显著上升,与治疗前表达比较有统计学差异(P<0.05)。结论：新辅助化疗可通过上调miRNA-99b表达,实现对宫颈癌的抑制。

宫颈癌传统的治疗方法是手术和放疗,近年来宫颈癌的化疗逐渐成为关注和研究的热点。吴维光等[1]为探讨miRNA-99b(miR-99b)调控宫颈癌细胞增殖和诱导凋亡的可能机制,应用Western blot 检测了miR-99b 靶基因CDC-25A 蛋白表达,发现miR-99b 上调表达后,细胞CDC-25A 表达降低。表明miR-99b 可通过调控靶基因CDC-25A 表达,调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡。据此分析,miR-99b 在宫颈癌的发生和发展过程中可能起重要作用,上调miR-99b 表达可抑制宫颈癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。miR-99b 有可能成为宫颈癌治疗的靶基因。本研究在前期观察了新辅助化疗对巨快性宫颈癌的临床治疗效果的基础上,进一步研究miR-99b在新辅助化疗宫颈癌前后组织中的表达。

资料与方法

1 一般资料 收集2014年1月至2015年6月我科就诊的宫颈癌患者55例,年龄35～68岁,平均54岁。Ib2期25例,IIa期 18例,IIb～IVa期 12例。鳞癌39例,腺癌14例,鳞腺癌2例。高分化29例,中分化15例,低分化11例。55例患者分别于新辅助化疗前后收集肿瘤组织标本。

2 实验方法 ①组织中micRNA的提取：使用RNAiso for Small RNA(TAKARA D340A)试剂盒进行组织中RNA的提取。②反转录：使用One Step PrimeScript miRNA cDNA Synthesis (TAKARA D350A)一步法miRNA反转录试剂盒进行miRNA反转录反应,取1000 ng RNA进行反转录。……