张腾国 周 轲 毛玉珊 聂亭亭 李 萍 刁志宏 王 娟

(西北师范大学 生命科学学院，兰州 730070)

柠条锦鸡儿CkGR基因克隆及功能分析

张腾国 周 轲 毛玉珊 聂亭亭 李 萍 刁志宏 王 娟

(西北师范大学 生命科学学院，兰州 730070)

通过RACE技术从柠条锦鸡儿中克隆得到一个新的GR基因，全长2 122 bp，包括5′非翻译区(5′-UTR)57 bp，3′非翻译区(3′-UTR)415 bp，开放阅读框(ORF)1 650 bp，编码550个氨基酸，推测的蛋白质分子量为59.2 kDa，理论等电点为8.2，命名为CkGR。CkGR与鹰嘴豆CaGR的同源性较高，为90.1%。利用染色体步移法克隆得到CkGR起始密码子ATG上游648 bp的启动子序列，PlantCARE软件分析表明，该序列具有启动子的基本元件CAAT-box和TATA-box以及多种与逆境胁迫相关的顺式调控元件。实时荧光定量PCR分析表明，CkGR在柠条锦鸡儿的根、茎和叶中均有表达，没有组织特异性；CkGR的表达受低温、高盐和干旱胁迫的诱导，表明CkGR在柠条锦鸡儿适应低温、高盐和干旱胁迫的过程中发挥作用。

柠条锦鸡儿；CkGR基因；分子克隆；表达分析

植物体内细胞的生理生化反应都可产生活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)。正常生长条件下，植物细胞中ROS的产生维持在较低的水平，需氧有机体能利用ROS调节代谢、进行信号传递和防御反应。然而，低温、高温、高盐、强光照、重金属、紫外辐射、空气中的O3和SO2、机械损伤等逆境条件都会导致植物体内产生大量的ROS[1]。ROS化学性质十分活泼，若不及时清除，可引起蛋白质、膜脂和其它细胞成分的损伤，进而导致细胞及组织的死亡[2]。处于逆境环境下的植物体本身常形成抗氧化系统，对胁迫造成的活性氧积累作出积极反应。植物细胞的抗氧化系统由抗氧化酶类和抗氧化剂类两部分组成，它们在植物体内都可消除ROS。……