李 晗 李治龙 李晓屿 李玉花 蓝兴国

(东北林业大学生命科学学院，哈尔滨 150040)

羽衣甘蓝不同组织及柱头发育实时荧光定量PCR内参基因的筛选

李 晗 李治龙 李晓屿 李玉花 蓝兴国*

(东北林业大学生命科学学院，哈尔滨 150040)

以羽衣甘蓝(Brassicaoleraceavar.acephala)S13-bS13-b自交不亲和系为试材，利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测Actin、Cpi6、EF-1β、GAPDH、Tub-α3、Tub-α6、Ubc7候选内参基因在不同组织和5个不同发育时期柱头的表达情况，并运用geNorm和BestKeeper软件统计分析候选内参基因的表达稳定性。在不同组织中，geNorm软件统计分析的结果表明Tub-α6和EF-1β的表达较稳定；BestKeeper软件统计分析的结果表明Ubc7和Tub-α6的表达较稳定。在不同发育柱头中，geNorm软件统计分析的结果表明Actin和Ubc7的表达较稳定；BestKeeper软件统计分析的结果表明EF-1β和Tub-α6的表达较稳定。以筛选到的内参基因Tub-α6和Actin，分别分析羽衣甘蓝柱头S-位点糖蛋白基因(SLG)在不同组织和不同发育时期柱头的表达水平，结果显示出SLG主要在柱头中表达，而且SLG在柱头发育成熟时期表达量达到最高。

羽衣甘蓝；实时荧光定量PCR；内参基因；柱头发育；SLG

羽衣甘蓝(Brassicaoleraceavar.acephala)属于十字花科(Brassicaceae)芸薹属(Brassica)植物，由于其叶色彩鲜艳且头部形状酷似牡丹，被称为“叶牡丹”[1]。由于其具有较强的耐寒性，是我国北方重要的绿化观赏植物[2～3]。在育种方面，由于羽衣甘蓝大部分栽培品种都具有自交不亲和性(Self-incompatibility，SI)，人们在育种过程中主要采用SI系进行羽衣甘蓝杂交种的生产[4]。

在芸薹属植物SI上的研究发现，SI反应与柱头的生长发育密切相关[5]。而且，SI相关的SLG(S-locus glycoprotein)、SRK(S-locus receptor kinase)、MLPK(M-locus protein kinase)和ARC1(Armadillo Repeat-Containing protein 1)基因表达具有柱头组织表达特异性，并且与柱头发育成熟性正相关[6～13]。……