刘彩霞 郑唐春 代丽娟 刘 轶 曲冠证

(东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，哈尔滨 150040)

拟南芥AtPI基因植物表达载体的构建及其在烟草中的遗传转化

刘彩霞 郑唐春 代丽娟 刘 轶 曲冠证*

(东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室，哈尔滨 150040)

花是被子植物主要的繁殖器官，在繁育后代的过程中，发挥着极其重要的作用，PISTILLATA(PI)基因作为控制花器官发育的B类功能基因中的一员，在花器官发育中起到重要的作用。为探究PI基因在花瓣和雄蕊发育中的功能，本文以拟南芥(Arabidopsisthaliana)中的PI基因作为研究对象，利用PCR技术从拟南芥花序cDNA扩增出AtPI基因，构建植物表达载体(pROKⅡ-AtPI)并进行烟草(Nicotianatobacum)转化。转基因植株的PCR检测结果表明，AtPI基因已经整合到了烟草基因组中。在T2代植株中，通过实时定量荧光PCR检测显示，AtPI在mRNA水平也均有表达。过量表达PI的转基因烟草在花器官中存在明显表型，与野生型相比主要表现为转基因植株花冠变小，雄蕊缩短，果实畸形且子房基部比野生型长5～10 mm，上述结果表明AtPI基因是特异性参与雄蕊和花瓣的发育并起着至关重要的作用。

拟南芥；PISTILLATA(PI)；烟草；雄蕊；花瓣；子房

花是被子植物区别于其他植物类群最重要的特征之一，其发育是一个相对保守的过程，从营养生长向生殖生长的转化是一个复杂的多步骤协同完成的过程，根据对模式植物的分子遗传学研究结果表明，花的发育受多个转录因子的调控，并形成一个复杂的调控网络[1]。1990年，Yanofsky等从拟南芥中克隆出同源异型基因Agamous，从此打开了研究同源异型基因调节花发育作用的大门。……