鲈鱼stat6 cDNA克隆及表达分析
2016-11-08于小娜刘艳杰钱云霞
于小娜, 刘艳杰, 钱云霞
(宁波大学 海洋学院, 宁波 315211)
鲈鱼stat6 cDNA克隆及表达分析
于小娜, 刘艳杰, 钱云霞
(宁波大学 海洋学院, 宁波 315211)
信号转导和转录激活因子6(Signal transducers and activators of transcription,STAT6)在白介素IL-4、IL-13诱导的炎症反应中起关键作用。利用RT-PCR和SMART RACE的方法从鲈鱼(Lateolabraxjaponicus)肝脏中克隆得到stat6全长cDNA序列。该序列的cDNA为3938 bp,5′ 非翻译区295 bp,3′ 非翻译区1369 bp,开放阅读框2274 bp,可编码757个氨基酸,蛋白质分子质量为86.43 ku,等电点为5.90。分析STAT6氨基酸序列发现,与鳜鱼相似性达93.7%;与人相似性为41.7%。荧光定量PCR结果表明,stat6在脾、头肾、大脑、肠和鳃中表达较高。腹腔注射哈维氏弧菌3 h后,stat6在脾、头肾、肠、鳃组织中的表达均显著上调(P<0.05),表明细菌感染会增加stat6的表达。研究结果为进一步研究鱼类stat6在病原菌感染免疫中的分子机制提供一定基础。
stat6;鲈鱼;克隆;组织表达
信号转导和转录激活因子(Signal transducers and activators of transcription,STATs)是一种存在于胞浆内的转录因子,能被多种配体激活形成二聚体,随后从细胞浆转移到细胞核,与目标基因启动子区的DNA结合,从而调节该基因的表达[1-2]。在哺乳动物中,STATs家族包含7个成员,即STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b和STAT6[3]。研究发现不同的STATs功能不同,在小鼠中证实STAT1在干扰素系统和先天免疫系统上起到至关重要的作用[4],白介素IL-6信号对STAT3在人类造血细胞和抗凋亡中是必需的[5]。STAT5a和STAT5b在小鼠生长、哺乳期和造血中有着重要功能[6]。以上研究表明了STAT1、STAT3和STAT5有广泛的生物学效应,而偶数STAT蛋白质功能相对受限制,大部分集中在免疫应答上,如STAT2被干扰素α/β激活,STAT4被IL12激活,STAT6被IL4和IL13激活[7-8]。
STAT6作为STATs的重要成员之一,Kaplan等[9]报道STAT6在白介素4(interleukin-4,IL-4)、白介素13(interleukin-13,IL-13)诱导的炎症反应中起关键作用。当IL-4和细胞膜上的IL-4 受体的α链发生结合后,IL-4 受体形成异二聚体,从而引发酪氨酸激酶系……
