王志胜，刘　芳，许梦微，乔永峰，侯继波，王继春*

(1.江苏省农业科学院/ 国家兽用生物制品工程技术研究中心，南京 210014；2.南京农业大学动物医学院，南京 210095；3.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009)



一种新型火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建与鉴定

王志胜1，3，刘芳1，2，许梦微1，2，乔永峰1，3，侯继波1，3，王继春1，3*

(1.江苏省农业科学院/ 国家兽用生物制品工程技术研究中心，南京 210014；2.南京农业大学动物医学院，南京 210095；3.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009)

拟构建一种新型火鸡疱疹病毒(HVT)全基因组细菌人工染色体(BAC)，通过同源重组方法将mini-F载体插入HVT基因组的糖蛋白C(glycoprotein C，gC)基因的等位位点得到mini-F重组HVT，提取重组病毒的DNA转入大肠杆菌DH10B细胞，再转入GS1783细胞获得BAC，拯救病毒获得mini-F重组病毒和gC恢复病毒后，与亲本病毒(HVT FC126)比较生长动力学和对鸡马立克病的免疫效力。结果：获得数个BAC阳性克隆，取其中一个克隆(BACHVT-G)成功拯救出HVT mini-F重组病毒(HVTBAC-ΔgC)，并成功获得了gC恢复毒株(HVTBAC-gC-R)。生长特性和免疫效力试验表明HVTBAC-gC-R与HVT FC126无显著差异，而HVTBAC-ΔgC增殖能力和免疫效力均明显下降。成功构建了HVT全基因组的感染性BAC；HVT的gC基因是一个非必需基因，但对病毒的增殖能力和免疫效力有重要影响。

火鸡疱疹病毒；细菌人工染色体；糖蛋白C；生长动力学；免疫效力

火鸡疱疹病毒(herpesvirus of turkey，HVT)属于甲型疱疹病毒亚科马立克病毒属，研究发现，在遗传学和血清学上，HVT与马立克病病毒(Marek’s disease virus，MDV)具有相关性[1]，且HVT对鸡不致病，HVT FC126株被广泛用于预防鸡的马立克病(Marek’s disease，MD)[2]。……