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葡萄糖⁃6⁃磷酸脱氢酶的表达抑制对A431细胞增殖和细胞周期的影响

2016-11-02李敏夏永华刘冬张孟杰田中伟李占国

中华皮肤科杂志 2016年11期
关键词:差异检测

李敏 夏永华 刘冬 张孟杰 田中伟 李占国

453100河南卫辉市,新乡医学院第一附属医院皮肤科

·论著·

葡萄糖⁃6⁃磷酸脱氢酶的表达抑制对A431细胞增殖和细胞周期的影响

李敏 夏永华 刘冬 张孟杰 田中伟 李占国

453100河南卫辉市,新乡医学院第一附属医院皮肤科

目的研究葡萄糖⁃6⁃磷酸脱氢酶(G6PD)表达下调对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞增殖和细胞周期的影响。方法正常培养人永生化上皮细胞HaCaT、皮肤鳞癌SCL⁃1和A431细胞,采用Western印迹法检测细胞中G6PD蛋白的表达。当A431细胞生长至85%~90%融合时,将siRNA对照(siRNA对照组)和G6PD siRNA(G6PD siRNA组)分别转染A431细胞,未转染的A431细胞则为未转染组。Western印迹法检测3组不同处理的A431细胞中G6PD蛋白及细胞周期蛋白D1、CDK4的表达,CCK⁃8法检测3组A431细胞的增殖情况,流式细胞仪分析3组A431细胞周期的变化。结果正常培养的2株皮肤鳞癌SCL⁃1和A431细胞中G6PD蛋白的表达水平(分别为0.308±0.023和0.643±0.046)均显著高于HaCaT细胞(0.100±0.019),且A431细胞显著高于SCL⁃1细胞(均P<0.05)。A431细胞G6PD siRNA组G6PD、细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白的表达(0.134±0.027、0.154±0.017、0.166±0.017)显著低于未转染组(0.425±0.029、0.344±0.024、0.330±0.020)和siRNA对照组(0.444±0.033、0.350±0.027、0.348±0.018),差异均有统计学意义(P<0.05)。G6PD siRNA组在24~96 h各时间点的细胞增殖活性均明显低于siRNA对照组和未转染组(P<0.001),而siRNA对照组与未转染组间细胞增殖差异无统计学意义(均P>0.05)。G6PD siRNA组G0/G1期A431细胞比例显著高于siRNA对照组及未转染组(P<0.001),而G6PD siRNA组S期A431细胞比例又显著低于siRNA对照组及未转染组(P<0.001)。结论G6PD可能在调控皮肤鳞癌细胞增殖和细胞周期中发挥重要作用。

癌,鳞状细胞;葡糖磷酸脱氢酶;细胞增殖;细胞周期;A431细胞

葡萄糖⁃6⁃磷酸脱氢酶(glucose⁃6⁃phosphate dehydrogenase,G6PD)是磷酸戊糖途径的第1个关键限速酶,可催化产生5⁃磷酸核糖,用于快速增殖细胞的DNA和RNA的合成[1⁃2],还可产生NADPH,提高肿瘤细胞的糖酵解率,增加代谢速率[3],进而加速肿瘤的生长。……

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