五味子多糖对SMMC-7721肝癌细胞凋亡的影响
2016-10-27孙雨薇闫冬梅
孙雨薇闫冬梅
(1.中国人民解放军第209医院 黑龙江牡丹江 157011;2.佳木斯大学基础医学院免疫教研室 黑龙江佳木斯 154007)
五味子多糖对SMMC-7721肝癌细胞凋亡的影响
孙雨薇1闫冬梅2*
(1.中国人民解放军第209医院 黑龙江牡丹江 157011;2.佳木斯大学基础医学院免疫教研室 黑龙江佳木斯 154007)
[目的]研究五味子多糖(SCP)对肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响。[方法] 不同浓度SCP作用于SMMC-7721,cck-8法检测药物对细胞增殖的影响;Tunnel检测细胞凋亡变化。[结果]SCP能够抑制肝癌细胞的增殖。荧光显微镜下可见细胞呈现典型的凋亡细胞形态。[结论]SCP能抑制肝癌细胞的增殖,诱导凋亡。但详细机制尚需进一步研究。
五味子多糖 SMMC-7721细胞 细胞凋亡
五味子多糖(SCP)是中药五味子的主要有效成分之一,具有较好的抑瘤作用[1]。本研究探讨SCP对SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响,从而为肝癌的治疗提供实验依据。
1 材料
1.1 细胞株
人肝癌SMMC-7721细胞株,本研究室保存。
1.2 药品
SCP购自宁夏宏德生物制品有限公司,用RPMI 1640培养液溶解成 200 mg/mL的储备液,过滤除菌, 4 ℃保存,实验时加培养液稀释至所需浓度。
1.3 试剂
RPMI 1640购自美国Hyclone 公司,新生牛血清购自杭州四季青公司,胰蛋白酶、CCK-8、Tunnel试剂盒、Hoechst33342购于碧云天生物技术研究所。
1.4 主要仪器
MCO-15AC恒温CO2培养箱(日本SANYO公司);Nikon ECLIPSE 80i荧光显微镜、DXM 1200 C数码相机(尼康公司);Multiskan Mk3酶标仪(Thermo公司)。
2 方法
2.1 细胞培养
SMMC-7721细胞培养于含10%灭活新生牛血清RPMI 1640培养基,37 ℃、5% CO2饱和湿度下常规培养,0.25%胰蛋白酶消化传代,每2-3 d传代1 次。
2.2 CCK-8法检测细胞增殖
SMMC-7721细胞经胰酶消化,以5×105个/mL接种于96孔板,每孔200 μL,37℃、5%CO2培养。当细胞融合达80%时,分别加入SCP(终质量……
