陈小华　邱华云　施珊珊　吴　莎　林　晨　李扬秋

(韶关学院医学院，韶关512000)



伊马替尼诱导原代T细胞凋亡作用机制研究①

陈小华邱华云施珊珊②吴莎②林晨②李扬秋③

(韶关学院医学院，韶关512000)

目的：研究伊马替尼(IM)诱导正常人原代CD3+T细胞凋亡的分子机制。方法：0～100 nmol/L的IM作用原代T细胞24 h后,应用流式细胞术检测细胞凋亡情况；应用实时荧光定量PCR技术检测Caspase-3、Caspase-8、A20和NF-κB基因表达变化；应用Western blot技术检测A20和NF-κB蛋白表达变化。结果：IM具有明显促T细胞凋亡能力，其凋亡分子Caspase-3 和A20基因表达水平均上调，而NF-κB的基因和蛋白水平均下调。结论：IM通过上调A20的表达诱导了T细胞的凋亡。

伊马替尼；原代CD3+T细胞；TNF-α诱导蛋白3;核转录因子

慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia，CML)是一类髓系增生性血液肿瘤，染色体异常是CML的直接病因，由9、22号染色体转位而成并含有bcr/abl融合基因，该基因转录翻译为BCR/ABL融合蛋白，而该融合蛋白的靶向药物伊马替尼(Imatinib mesylate,IM)，是目前临床上用于治疗CML慢性期的一线药物[1,2]。但临床研究报道其具有抑制机体免疫功能的副作用，尤其是抑制T细胞的能力[2-4]。细胞免疫在抗肿瘤中发挥重要的作用，T细胞的凋亡活动与细胞内一系列信号分子的转导有关，如Caspase-3、Caspase-8、A20和NF-κB等[5]。

1　材料与方法

1.1材料1640培养基购自Gibco；小牛血清购自Hyclone；TRIzol购自康为世纪公司；伊马替尼购自Sigma；逆转录和荧光定量PCR试剂盒购自Toyobo；细胞裂解液和BCA试剂盒购自凯基生物公司；A20抗体购自Abcam、NF-κB p65抗体购自CST；凋亡试剂盒购自联科生物公司；引物由上海生工公司合成。

1.2方法

1.2.1分离人外周血单个核细胞实验所需人外周血在征得本人同意后，采自5位正常人。……