应用唾液酸糖基转移酶基因芯片检测ST3GalⅤ在人肝癌细胞系中的表达
2016-10-21张艳付浩冮岩赵雨杰何群
张艳,付浩,冮岩,赵雨杰,何群
(1.沈阳医学院基础医学院生物化学教研室,辽宁 沈阳 110034;2.中国医科大学基础医学院生物芯片中心)
应用唾液酸糖基转移酶基因芯片检测ST3GalⅤ在人肝癌细胞系中的表达
张艳1,付浩1,冮岩1,赵雨杰2,何群2
(1.沈阳医学院基础医学院生物化学教研室,辽宁 沈阳 110034;2.中国医科大学基础医学院生物芯片中心)
目的:通过唾液酸糖基转移酶基因芯片检测ST3GalⅤ在人正常肝细胞系L-02及肝癌细胞系HepG-2和SMMC-7721中的表达差异。方法:制备唾液酸糖基转移酶基因芯片,应用基因芯片检测ST3GalⅤ在人正常肝细胞系L-02及肝癌细胞系HepG-2和SMMC-7721中的表达,并通过蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达水平。结果:唾液酸糖基转移酶ST3GalⅤ在人肝癌细胞系中表达降低。结论:ST3GalⅤ在肝癌细胞系中表达水平的降低导致神经节苷脂GD1a的合成下降从而影响肝细胞的生长增殖。
基因芯片;唾液酸糖基转移酶;ST3GalⅤ;肝癌
[Abstract]Objective:To investigate the differential expression of ST3GalⅤ in human hepatic carcinoma cell lines,HepG-2 and SMMC-7721 and normal hepatic cell line,L-02 by sialyltransferase DNA microarray.Methods:Expression of ST3Gal family was measured with DNA microarray.Western blot was used to verify DNA microarrays data.Result:ST3GalⅤdownregulated in HepG-2 and SMMC-7721 cell lines,compared with control cell line.Conclusion:The downregulation of ST3GalⅤ in HepG-2 and SMMC-7721 cell lines may result in the reduction of GD1a and influence the hepatocyte proliferations.
[Key words]DNA microarray;sialyltransferase;ST3GalⅤ;hepatic carcinoma
糖基转移酶表达的差异不仅可以导致细胞膜表面糖链表达的改变,还参与细胞增殖调控。ST3GalⅤ是唾液酸糖基转移酶ST3Gal家族的一员,也称GM3合酶,其表达含量的高低目前已作为检测GM3含量的直接标准[1]。有研究显示,在某些癌症的治疗中单纯增加外源性GM3可以很好地抑制肿瘤细胞的生长增殖。为了解ST3GalⅤ在人肝癌中的表达及其在肝癌发病机制中的作用,本研究制备了唾液酸糖基转移酶ST3Gal家族基因芯片,检测ST3Gal家族主要成员的表达水平,并通过蛋白质印迹(Western blot)法对蛋白表达进行检测,旨在了解唾液酸糖基转移酶在人肝癌细胞中表达的变化,为进一步研究唾液酸糖基转移酶在肝癌发生发展过程中的作用提供理论依据。……
