丙型肝炎病毒核心抗原酶标抗体的制备及ELISA检测方法的建立
2016-10-19谭柏清
刘 旭,谭柏清,王 进
(1.山东恒信检测技术开发中心;2.山东博科生物产业有限公司,济南 250200)
丙型肝炎病毒核心抗原酶标抗体的制备及ELISA检测方法的建立
刘 旭1,谭柏清2,王 进2
(1.山东恒信检测技术开发中心;2.山东博科生物产业有限公司,济南 250200)
将抗丙型肝炎病毒核心抗原抗体(Anti-HCV Core protein)应用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶(HRP),制备抗丙型肝炎病毒核心抗原酶标抗体,根据酶联免疫操作步骤,应用美国Ortho公司试剂盒的其它组分,建立一种丙型肝炎病毒核心抗原双抗夹心检测法,并对比市场上的试剂盒进行检测。
丙型肝炎病毒核心抗原;辣根过氧化物酶;标记;临床
0 引言
丙型病毒性肝炎,简称为丙型肝炎、丙肝,是一种由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎,主要经输血、针刺、吸毒等传播。
本实验通过用辣根过氧化物酶(HRP),对抗丙肝核心抗原抗体进行标记,利用美国ortho公司成品试剂盒的其他组分,组装形成丙型肝炎核心抗原检测试剂盒,验证自制试剂盒的准确性、特异性以及与ortho公司产品的相关性。
1 材料和方法
1.1 材料
(1)实验试剂。辣根过氧化物酶(sigma);过碘酸钠(百灵威科技有限公司);抗HCV-cΑg单克隆抗体(美国赛莱克斯cellex公司);丙型肝炎核心抗原检测试剂盒(美国0rtho公司);0.2mol/L,pH5.6醋酸盐缓冲液;0.01mol/L,pH7.4 磷酸盐缓冲液;1.0mol/L, pH9.5 碳酸盐缓冲液。(2)主要仪器。BIOBΑSE8001全自动酶免工作站,山东博科生物产业有限公司;BIOBΑSE洗板机,山东博科生物产业有限公司;DHP-260恒温培养箱,常州中捷实验仪器制造有限公司;微孔板恒温振荡器,上海岛韩实业有限公司;……
