张彩霞　王丽萍　武建军　赵灵燕

内蒙古医科大学附属医院1妇产科，2消化科，呼和浩特0100593内蒙古医科大学研究生学院呼和浩特010059

4内蒙古医科大学公共卫生学院呼和浩特010059

ILT4与Ki67在上皮性卵巢癌淋巴结转移患者中的表达情况

张彩霞1王丽萍2#武建军3赵灵燕4

内蒙古医科大学附属医院1妇产科，2消化科，呼和浩特0100593内蒙古医科大学研究生学院呼和浩特010059

4内蒙古医科大学公共卫生学院呼和浩特010059

目的探讨免疫球蛋白样转录子4（ILT4）与Ki67在上皮性卵巢癌淋巴结转移患者中的表达情况。方法回顾性分析70例上皮性卵巢癌患者，通过淋巴结转移情况分为淋巴结转移组（37例）和无淋巴结转移组（33例），观察两组患者ILT4、Ki67的表达情况。结果免疫组织化学结果显示，淋巴结转移组中，卵巢癌组织中ILT4表达水平低于无淋巴结转移组，Ki67表达水平高于无淋巴结转移组（P＜0.05）；淋巴结转移组ILT4阳性率35.14%（13/37）低于无淋巴结转移组的84.85%（28/33），差异有统计学意义（P＜0.05）；淋巴结转移组Ki67阳性率表达81.08%（30/37）高于无淋巴结转移组的45.45%（15/33），差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在上皮性卵巢癌淋巴结转移患者中，ILT4水平表达降低，Ki67表达升高，可将其作为诊断病情的指标。

上皮性卵巢癌；淋巴结转移；免疫球蛋白样转录子4；Ki67

Oncol Prog，2016，14（6）

上皮性卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤，该病发病隐匿，易复发转移，并且在临床上缺少早期诊断方法，若未及时能作出早期诊断，则预后较差［1-2］。在上皮性卵巢癌患者中，淋巴结转移对肿瘤分期及评估预后有重要意义［3-4］。研究显示，免疫球蛋白样转录子4（immunoglobulin-like transcript 4，ILT4）和Ki67与淋巴结转移存在密切联系，但在妇科肿瘤中对于这两种指标的研究较少［5］。本研究对上皮性卵巢癌患者中ILT4与Ki67表达与淋巴结转移的相关性进行了研究，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取2014年11月至2015年11月在我院通过病理学诊断确诊为上皮性卵巢癌的患者70例。纳入标准：①通过国际妇产科联盟（FIGO）中对卵巢恶性肿瘤分期结果均为Ⅲ、Ⅵ期［6］；②均为初次发病，且是散发病例。根据病理证实是否存有淋巴结转移，将患者分为淋巴结转移组37例和吴林坝转移组33例。年龄34～72岁，平均为（50.49±3.71）岁，其中浆液性癌18例，黏液性癌16例，子宫内膜样癌3例，肿瘤分期Ⅲ期30例，Ⅵ期7例；无淋巴结转移组患者年龄35～71岁，平均为（51.19±3.69）岁，浆液性癌17例，黏液性癌14例，子宫内膜样癌2例，肿瘤分期Ⅲ期26例，Ⅵ期7例。而且一般资料特征比较，差异无统计学意义（P＞0.05），可以进行对比分析。

1.2方法

采取所有患者卵巢癌组织，使用4%多聚甲醛固定，石蜡包埋切片。使用免疫组化二步法染色，切片常规脱蜡，在4%H2O2中进行孵育10 min，水浴95℃，15 min抗原修复，加入200倍稀释的一抗之后，4℃过夜；PBS冲洗2～3次，滴入Polymer Helper试剂，37℃孵育20 min；PBS冲洗2～3次，滴入IgG；37℃孵育20 min，PBS冲洗2～3次；DAB显色，自来水冲洗干净，复染、脱水、透明和封片等操作。最后采用PBS进行阴性对照，使用光学显微镜进行观察。其中鼠抗人Ki67单克隆抗体由美国Changdao公司进行提供，鼠抗人ILT4单克隆抗体由美国Sunbio公司提供。通过染色的有无及强弱情况进行分级，无染色情况为阴性（-），部分肿瘤细胞发生染色为弱阳性（+），所有肿瘤细胞发生染色为强阳性（++）。并结合HE染色，选择5个无坏死细胞的视野，使用图像分析团建对阳性细胞进行计数，计算每个视野中每1000个细胞中阳性细胞所占的百分比，表示阳性细胞率表达情况。

1.3统计学分析

数据用SPSS1-8.0软件包进行处理，计量资料用均数±标准差（±s）表示，并采用t检验，计数资料的比较采用χ2检验，等级资料的比较采用秩和检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2　结果

淋巴结转移组患者卵巢癌组织中ILT4表达水平低于无淋巴结转移组，差异有统计学意义（P＜0.05）。淋巴结转移组卵巢癌组织中Ki67表达水平高于无淋巴结转移组，差异有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1　两组患者ILT4和Ki67表达水平（%，±s）

表1　两组患者ILT4和Ki67表达水平（%，±s）

组别淋巴结转移组（n=37）无淋巴结转移组（n=33）ILT4表达15.67±2.15 31.24±6.81 Ki67表达38.87±11.23 24.52±6.19

在淋巴结转移患者中，ILT4（-）的患者高达64.86%（24/37），ILT4（+）及ILT4（++）的患者依次减少；而无淋巴结转移组ILT4（+）患者占54.55%（18/33），其次是ILT4（++）和ILT4（-），两组ILT4强弱表达情况经秩和检验分析，差异有统计学差异（P＜0.05）。有淋巴结转移组患者ILT4阳性率35.14%（13/37），低于无淋巴结转移组患者的84.85%（28/33），差异有统计学意义（P＜0.05）。（表2）

表2　两组患者ILT4表达强弱及阳性率比较［n（%）］

2.3两组患者Ki67表达强弱及阳性率比较

在淋巴结转移患者中，Ki67（+）患者占56.76%（21/37），其次是Ki67（++）和Ki67（-）；无淋巴结转移组中，Ki67（-）患者占54.54%（18/33），其次是Ki67（+）和Ki67（++），两组Ki67强弱表达情况经秩和检验分析，差异有统计学差异（P＜0.05）。有淋巴结转移组患者Ki67阳性率81.08%（30/37），高于无淋巴结转移组患者的45.45%（15/33），差异具有统计学意义（P＜0.05）。（表3）

表3　两组患者Ki67表达强弱及阳性率［n（%）］

3　讨论

卵巢的恶性肿瘤在早期诊断上较为困难，约70%的患者在发现时已经属肿瘤晚期，致使预后差，且病死率高［7-8］。淋巴结转移是上皮性卵巢癌中临床分期的重要依据，也是指导治疗及判断预后的重要因素。研究表明，在肿瘤细胞中，某些分子表达与否和水平高低与淋巴结是否转移之间存在着一定联系［9］。因此在上皮性卵巢癌中，寻找可靠的指标对病情分期的判断及预后都具有重要的临床意义。

ILT4是ILTs家族中的重要成员，属抑制性受体，在单核细胞、树突状细胞、T淋巴细胞和自然杀伤细胞中，都有不同程度的表达，调节机体免疫反应，且和多种组织相容性复合体分子等相互结合，向细胞内传达信号，抑制细胞免疫功能。研究显示，ILT4与其配体结合，通过细胞内免疫络氨酸抑制基序的传递下发出负调节信号，从而抑制淋巴细胞的活化和增殖情况［10］。研究显示，ILT4在肺癌组织中有不同程度表达，且和肺癌的发生进展有密切联系［11-12］。采用免疫组化法检测ILT4表达水平，结果显示，ILT4随上皮性卵巢癌的发展，表达强度逐渐下降，在存在淋巴结转移患者的卵巢癌组织中ILT4表达水平低于无淋巴结转移的患者，且阳性率的表达情况也低于无淋巴结转移的患者，差异均有统计学意义。表明ILT4与上皮性卵巢癌发生发展有紧密关系，可成为上皮性卵巢癌临床诊断的指标。

Ki67是反应恶性肿瘤细胞的增殖活性重要分子标志物，是目前对肿瘤增殖活性和增殖速率检测的可靠指标。肿瘤的增殖、浸润转移及预后间关系密切，Ki67的表达对细胞增殖及患者预后评估具有重要临床意义。研究显示，在上皮性卵巢癌患者中，Ki67表达水平高于良性卵巢上皮性肿瘤患者，且随着肿瘤分期的增高，Ki67表达水平也呈上升趋势［13-14］。本研究结果显示，淋巴结转移患者卵巢癌组织中Ki67表达水平高于未发生淋巴结转移的患者，且阳性率高于未发生淋巴结转移的患者，表明Ki67的表达可提示肿瘤细胞的增殖活性和速率，Ki67表达越高，患者体内的肿瘤细胞增殖速率越快，易受到侵袭而发生淋巴结转移。此次研究结果限制，可以将Ki67的表达作为判断是否有淋巴转移情况的重要参考指标，对今后在肿瘤的治疗方式、疗效评估及预后中都存在积极的临床意义。

综上所述，在上皮性卵巢癌中，淋巴结转移的患者ILT4表达水平低于无淋巴结转移患者，Ki67表达水平高于无淋巴结转移患者，这两个指标可为临床诊治起到积极作用。

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Expression of ILT4 and Ki67 in patients with epithelial ovarian carcinoma and lymph node metastasis

ZHANG Cai-xia1WANG Li-ping2#WU Jian-jun3ZHAO Ling-yan41Department of Obstetrics，2Department of Gastroenterology，Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical College，Hohhot 010059，Inner Mongolia，China
3Graduate School，4School of Public Health，Inner Mongolia Medical College，Hohhot 010059，Inner Mongolia，China

ObjectiveTo investigate the expression profile of ILT4 and Ki67 in patients with epithelial ovarian carcinoma and lymph node metastasis.MethodA retrospective analysis was performed in 70 patients with epithelial ovarian cancer，who were stratified as lymph node metastasis group（n=37）and non-lymph node metastasis group（n=33）by respective status of metastasis.The expression of ILT4 and Ki67 in both groups were analyzed.ResultIn immunohistochemical analysis，the expression of ILT4 in ovarian cancer tissue of metastasis group was lower than that in non-metastasis group，while the expression of Ki67 was higher in the former than that in the latter（P＜0.05）；the positive rate of ILT4 expression in metastasis group was 35.14%（13/37），lower than that in non-metastasis group at 84.85%（28/33），with significant difference observed（P＜0.05）；while the positive rate of Ki67 was 81.08%（30/37）in metastasis group，higher than that in non-metastasis group at 45.45%（15/33），which was of significant difference（P＜0.05）.Conclusion In epithelial ovarian cancer patients with lymph node metastasis，it is common that low ILT4 expression is accompanied by high expression of Ki67，which can be used as an important index for the diagnosis.

epithelial ovarian cancer；lymphatic metastasis；immunoglobulin-like transcript 4；Ki67

R737.31

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.06.28

2016-02-28）

（corresponding author），邮箱：946908569@qq.com