陈华

（张家港市环境监测站江苏张家港215600）

浅析叶绿素a测定比色法与仪器法比对试验

陈华

（张家港市环境监测站江苏张家港215600）

文中就比色法与手持式叶绿素测定仪对浮游植物叶绿素a的测定进行了两种方法的比对和探讨，保证和提高监测结果的有效性和准确性。在环境监测中，通过测定浮游植物叶绿素，可掌握水体的初级生产力情况。

叶绿素a；比对实验；结果分析

1　仪器设备

1.1ChloroTech121A型手持式叶绿素测定仪。

1.2TU-1901可见紫外分光光度计、离心机等。

2　比对实验

2.1比色法测定

2.1.1在抽滤器上装好乙酸纤维滤膜（孔径0.45μm），倒入定量体积的水样进行抽滤。

2.1.2取出带有浮游植物的滤膜，在冰箱内低温干燥6h～8h。

2.1.3将干燥后的滤膜放入研磨器中，加入少量碳酸镁粉末及2 mL～3mL90%的丙酮，充分研磨，提取叶绿素a。将上清液转移到10mL具塞离心管。用离心机（3000r/min～4000r/min)离心10min。

2.1.4将离心上清液用90%的丙酮定容到10mL。

2.1.5将定容后的溶液在分光光度计上，用1cm光程的比色皿，分别读取750nm、663nm、645nm、630nm波长的吸光度，并以90%的丙酮作空白，对样品吸光度校正。

2.1.6计算

叶绿素a（mg/m3)=

2.2手持式叶绿素仪测定

2.2.1按住“ON/OFF”约2s，出现开机画面后，松开按键，进入开机欢迎界面。

2.2.2按“△”或“▽”键选择程序1，按“ENTER”键进入。

2.2.3样品测量：用吸管移取蒸馏水至方形比色皿中大约2/3处，将比色皿放入测量池中，盖上盖子，按“CAL”键校准空白，然后按“ENTER”键保存空白。

用吸管移取待测水样至方形比色皿中大约2/3处，将比色皿放入测量池中，盖上盖子，当倒计时为“00”时，按“READ”读取样品。2s后，测量结束，显示样品结果。

3　比对数据

叶绿素项目没有标准物质可作为控制样，通过水和废水监测分析方法(第四版)叶绿素a的测定与手持式叶绿素测定仪对对实际采集的5批水样进行比对分析，计算测定结果的相对偏差。

表1　实际采集5批水样进行比对

4　结语

通过两种方法的比对显示所测结果无显著性差异。在叶绿素a比色法受诸多因素等限制的前提下，ChloroTech121A型手持式叶绿素测定仪具有操作便捷、快速、稳定并可进行现场测定等优点，保证和提高了监测结果的有效性和准确性。

[1]国家环保总局.水和废水监测分析方法:第四版.北京：中国环境科学出版社,2002.

[2]ChloroTech121A型手持式叶绿素测定仪操作手册.Environ Lab &Techlnc.中国技术服务中心,2012.