彭冬 杨威 王昭 王席 柳忠玉

（长江大学生命科学学院，荆州 434025）

GST-SUMO-MT融合蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达

彭冬 杨威 王昭 王席 柳忠玉

（长江大学生命科学学院，荆州 434025）

旨在考察在大肠杆菌中自诱导表达GST-SUMO-MT融合蛋白的可行性，并对自诱导培养条件及培养基成分进行优化，以提高蛋白产量。采用摇瓶培养，利用单因素和正交实验对工程菌自诱导的培养条件（诱导时间、诱导温度）和培养基组分（蛋白胨、酵母粉、甘油、葡萄糖、乳糖）进行优化，检测菌体浓度、可溶性目的蛋白的表达量。结果表明，自诱导培养基碳氮源的最优配比为：2% 蛋白胨、2% 酵母粉、0.3% 甘油、0.05% 葡萄糖和0.3% 乳糖。重组菌自诱导表达最优发酵条件为：采用两阶段温度控制，37℃培养3 h，25℃继续培养 13 h。此时可溶性目的蛋白的表达量和菌体浓度分别为 LB 培养基（IPTG 诱导）的 2.2倍和2.3倍。

金属硫蛋白；融合蛋白；可溶性表达；自诱导

金属硫蛋白（Metallothionein，MT）是一类普遍存在于生物体内的富含半胱氨酸、相对分子质量较低的金属结合蛋白，具有高诱导特性和多种生物学功能。目前比较明确的是MT具有清除体内自由基、参与体内微量元素代谢、解除重金属的毒性、增强机体各种不良状态的适应能力、调控机体生长发育和细胞代谢等功能，MT还参与纤维化疾病、神经退行性疾病及肿瘤的发生发展［1］。采用基因工程方法规模化生产制备金属硫蛋白，对其应用开发和作用机理的研究具有重要的意义。目前，不同来源MT基因先后被克隆入不同的表达载体，在大肠杆菌中进行表达［2-4］。……