卢小明，谢柱彬，殷进方，卢伟昌，张险朋（.东莞市东坑镇农业技术服务中心，广东 东莞 ；.东莞市动物疫病预防控制中心，广东 东莞 53086）

东莞市鸡新城疫免疫效果调查

卢小明1，谢柱彬1，殷进方2，卢伟昌1，张险朋2
（1.东莞市东坑镇农业技术服务中心，广东 东莞 ；2.东莞市动物疫病预防控制中心，广东 东莞 523086）

为了摸清东莞市鸡新城疫的免疫效果，2015年在东莞市10个规模养鸡场和6个镇的鸡散养户共采集了1553份鸡血清，采用血凝与血凝抑制试验方法进行检测。结果为东莞市鸡新城疫抗体阳性数为1083份，阳性率为69.74%，其中规模养鸡场新城疫抗体阳性率为86.80%，散养户鸡抗体阳性率为46.59%。结果表明，东莞市规模养殖场鸡新城疫的抗体水平总体比较高，散养鸡的抗体水平偏低，存在新城疫病毒感染的风险。

新城疫；血凝与血凝抑制试验；免疫效果；鸡

鸡新城疫又称伪鸡瘟，亚洲鸡瘟，是由新城疫病毒（newcastle disease，virus，NDV）引起的鸡和多种禽类急性高度接触传染性疾病。主要临床症状表现为呼吸困难，下痢，神经紊乱，黏膜和浆膜出血，具有很高的发病率和病死率。新城疫是危害养鸡业的重要传染病之一，给养鸡业造成了很大的经济损失，OIE将其列为A类疫病。鸡发生新城疫没有特效的药物可以治疗，疫苗免疫是预防新城疫最有效的措施。为了摸清东莞市鸡新城疫的免疫情况，2015年，在东莞市选取10个规模鸡养殖场和6个镇（街）的鸡散养户进行抗体监测，现将监测结果报告如下。

1　材料与方法

1.1鸡血清

共1553份鸡血清，2015年采自东莞市10个规模鸡养殖场和6个镇（街）的鸡散养户。以翅静脉采血，以3500r/min离心15 min分离获得待检血清，-20℃保存备检。

1.2试剂

1.2.1新城疫抗原和阳性血清购自中国哈尔滨维科生物科技有限公司，批号分别为14M013，2013002。

1.2.1主要耗材和仪器96孔“V”型微量反应板，微量震荡器，8道移液器，离心机。

1.3方法按照《新城疫诊断技术》（GB/T 16550-2008）规定的血凝与血凝抑制方法操作。

1.3.11%鸡红细胞悬液采集实验室饲养的3只新城疫和禽流感非免疫的健康公鸡的血液与阿氏液等体积混合，用pH值7.2的0.01mol/L PBS液洗涤3次，每次以1000r/min离心10min，洗涤后用PBS液配成体积分数1%鸡红细胞悬液，4℃保存备用。

1.3.24HA单位抗原的配制取出冻干的浓缩新城疫抗原，加入2 mLPBS液稀释融化后，测其抗原效价。能够完全引起血凝的病毒最高稀释度即为抗原效价，以此稀释度作为1个HA单位抗原，配制4个HA单位抗原。

1.3.3血凝抑制方法取出96孔“V”型微量反应板，用移液器在第1～11孔加入0.025mLPBS，12孔加入0.05mLPBS；第1孔加入0.025mL待检血清，倍比稀释至第10孔，第11孔为阳性对照，第12孔位PBS液对照。在第1～11孔加入0.025mL含4U的新城疫抗原，震荡混匀，室温（20～25℃）下静置不少于30min。每孔加入0.025mL 1%鸡红细胞悬液，震荡混匀，室温（20～25℃）下静置40min，当PBS液对照孔红细胞呈明显纽扣状沉到孔底时，判读结果。

1.3.4结果判定在PBS液对照孔结果成立的情况下，将反应板倾斜，从背侧观察，以红细胞呈泪流状流下为最高稀释滴度。血清样品HI效价大于等于4log2，判为新城疫抗体阳性。

2　结果与分析

2.1鸡新城疫抗体检测结果

2015年共检测鸡血清1553份，鸡新城疫抗体阳性1083份，抗体阳性率为69.74%，其中检测规模场鸡血清894份，新城疫抗体阳性776份，抗体阳性率为86.80%，检测散养户鸡血清659份，新城疫抗体阳性307份，抗体阳性率为46.59%，详细结果见表1。

表1　2015年鸡新城疫抗体检测结果

2.2部分规模养殖场鸡新城疫抗体检测结果

在10个规模养殖场中，鸡新城疫抗体阳性率最高的为100%，最低的养殖场为37.89%，其他养殖场的抗体阳性率介于37.89%～100%之间，详细结果见表2。结果表明，各养殖场鸡新城疫的抗体阳性率存在差异，新城疫的免疫情况参差不齐。

表2　2015年东莞市部分鸡养殖场新城疫抗体检测结果

2.3部分镇（街）散养的鸡新城疫抗体检测结果

在6个镇（街）的散养户中，鸡新城疫抗体阳性率为46.59%，抗体阳性率最高的镇（街）为64.80%，最低的为26.00%，详细结果见表3。结果表明，散养户鸡新城疫抗体水平普遍比较低，达不到农业部规定免疫合格率大于等于70%的要求，存在新城疫病毒感染的风险。

表3　2015年部分镇（街）散养鸡新城疫抗体检测结果

3　讨　论

3.1疫苗免疫是预防新城疫的最有效措施，根据调查结果，东莞市规模场鸡新城疫的抗体阳性率为86.80%，抗体水平处于较高的水平，但从不同养殖场来看，有4个养殖场抗体水平比较低，达不到国家规定的大于等于70%的标准，占监测养殖场的40%。鸡新城疫的免疫效果好坏与与生产管理有密切的管理，一般情况下，种鸡场的生产管理要好于一般的蛋鸡场和肉鸡场，在此次调查中，选择的2个种鸡场抗体阳性率均达到了100%。

3.2从不同场所鸡新城疫的监测结果分析，规模场鸡新城疫的抗体免疫合格率明显高于散养的鸡。规模场一般情况下根据场的实际情况制定新城疫免疫计划，并按照计划进行免疫，定期采样进行监测，发现抗体水平不合格及时进行补免。散养的户，分别广，饲养条件普遍比较差，防疫意识差，通常只在集中大防时免疫一次，抗体水平偏低，不足于抵抗野毒的侵袭，是发生疫情的一个风险，应该重点加强监督。

3.3造成新城疫免疫失败的原因有多，主要有以下几个方面。（1）鸡母源抗体的干扰。母鸡的母源抗体会通过蛋黄传给雏鸡，此时接种新城疫疫苗，母源抗体可抑制雏鸡的免疫保护力。（2）鸡体内存在免疫抑制性病毒。传染性法氏囊病、网状内皮组织增生症、鸡传贫、呼肠孤病毒、白血病、马立克氏病等都有可能损伤中枢和外周免疫器官，使得新城疫疫苗的免疫应答受到严重抑制。（3）疫苗的质量、类型影响疫苗免疫效果。（4）疫苗免疫的程序，免疫技术，免疫剂量，免疫接种的时间，免疫接种的途径。（5）饲养管理的好坏，环境的是否存在野毒，应激等因素均可影响疫苗的免疫效果。

［1］童光志主编.动物传染病学［M］.北京：中国农业出版社，2008.547.

［2］赵瑞宏，等.不同新城疫疫苗和免疫途径对鸡新城疫HI抗体的影响［J］.现代农业科技，2009，19：303-304.

［3］孟建斌，等.陕北地区鸡新城疫免疫监测及分析［J］.畜牧兽医杂志，2012，39（6）：4-5.

［4］吴玲，等.影响鸡新城疫免疫效果的因素及应对措施［J］.现代农业科技，2014，18：254-256.

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.08.029

卢小明（1982～），广东省东莞市人，助理兽医师，从事动物疫病防控工作