方欢乐　陈衍斌　韩宁娟　马怀芬　邓文丹　张小丽

西安培华学院医学院(西安 710125)



·实验研究·

龙生蛭胶囊对高脂大鼠动脉粥样硬化的影响*

方欢乐陈衍斌△韩宁娟马怀芬邓文丹张小丽▲

西安培华学院医学院(西安 710125)

目的：探讨龙生蛭胶囊改善动脉粥样硬化大鼠血脂、血流变及抗氧化的作用。方法：大鼠高脂饲料加腹腔注射维生素D3，复制AS模型，检测龙生蛭胶囊对大鼠血清血脂、血液流变学、抗氧化指标的影响。结果：与模型组比较，中、高剂量组药物能显著降低AS大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LHL)水平，升高高密度脂蛋白(HDL)水平。同时也能降低AS大鼠全血黏度(高、中、低切)、血浆黏度和红细胞压积。药物和模型组比较能显著降低血液中MDA含量，提高SOD活性。结论：龙生蛭胶囊可以改善AS大鼠氧化应激反应，降低大鼠血脂、血液流变学指标。

主题词动脉硬化/中西医结合疗法@龙生蛭胶囊实验，动物

心脑血管疾病是世界上发病率和病死率较高的疾病之一。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是导致其发生的重要病理基础。AS的病因比较复杂,发病机制涉及脂质代谢、血栓形成及氧化应激等多个方面[1]。现代医学能根据其发病机制对AS 提出不少的治疗方法。中医药在治疗动脉硬化的过程中，以辨证论治的原则为依据，在AS病变的预防和治疗方面有着极大的潜力，药物在疗效性和安全性方面都有很好的表现[2]。龙生蛭胶囊由黄芪、水蛭、川芎、当归等12味中药组成，是治疗心脑血管疾病的现代中药制剂，具有补气活血、逐瘀通络的功效，临床上用于脑梗塞恢复期中医辨证为气虚血瘀型中风中经络者。有文献报道表明龙生蛭胶囊在脑血栓防治中疗效确切，但药物是否通过抗氧化、降血脂对抗动脉粥样硬化改善心脑血管疾病作用不清楚[3-4]。本实验研究进行了龙生蛭胶囊抗早期动脉粥样硬化形成实验研究。为药物深入的开发研究提供依据。

1材料1.1动物雄性SD大鼠，体重180～220g，实验动物由第四军医大学实验动物中心提供，生产许可证号:SCXK(军)2012-0007。

1.2药物与试剂龙生蛭胶囊(批号：20150914)、维生素D(批号:20100601)、胆酸钠(批号:110728)、胆固醇(批号:111025)、辛伐他汀片(批号11A141205)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)试剂盒(批号为20150211，20150207)。

1.3仪器实验包括台式离心机 H-1600A(江东仪器)；电热恒温干燥箱202-2AB型；iMark全自动酶标仪；CKX4 荧光倒置相差显微镜；JA10003B大量程电子精密天平；LBY-N6 型血液流变仪。

2方法2.1模型建立及动物分组、给药取实验大鼠60组，适应性喂养1周，随机分为空白对照组(给以正常饲料)；模型组(给予高脂饲料)；阳性对照组(辛伐他汀)及龙生蛭低、中、高剂量组。每组大鼠10只。按文献[5]的方法建立高血脂并动脉粥样硬化模型，实验进行高脂饲料(高脂饲料配方如下：3%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白糖、10%猪油、81.3%基础饲料)喂养，实验开始时一次性腹腔注射维生素D3注射液60万IU/kg。动物持续高脂喂养8周。高脂喂养4周后，对照组和模型组每天灌胃等体积生理盐水；辛伐他汀组、龙生蛭低中高剂量组，每天给高脂饲料同时间灌胃给药1次，给药量为辛伐他汀组5.5mg/kg；龙生蛭低剂量0.72g/kg、中剂量1.44g/kg、高剂量2.88g/kg。

2.2相关指标的检测血脂的检测末次给药后，禁食禁水12h。第2日，用20%乌拉坦(0.5ml/100g)溶液麻醉大鼠。打开腹腔，10ml无菌注射器插入腹主动脉抽血。3500 r/min离心10min分离血清，测定TG、TC 、HDL-C 和LDL-C，具体操作按试剂盒说明书完成。抗氧化指标检测：采用硫代巴比妥酸法测定MDA 含量；黄嘌呤氧化法测定SOD活力。腹主动脉HE染色：打开腹腔，于腹主动脉同一部位取材，放置于15%甲醛溶液中固定，再经过石蜡包埋、切片进行HE 染色。血液流变学检测：用LBY-N6 型血液流变仪，分别测定全血低切、中切、高切黏度及血浆黏度。

3结果3.1AS模型的判定将大鼠喂养8周后，腹主动脉HE染色显示，模型组大鼠腹主动脉壁增厚，内皮细胞呈连续性缺失，内皮下间隙增宽，可见中膜平滑肌细胞间隙增加堆积，但未见明显脂质斑块形成，初步判定为动脉粥样硬化形成早期。结果见图1。

3.2各组大鼠体重的影响大鼠在饲养过程中，每周称重1次，对0、2、4、6、8周各组大鼠体重进行分析，模型组和空白

对照组比较体重增加显著(P<0.05)，两组比较无显著性差异。结果见表1。

表1　各组大鼠体重变化(g)

3.3对血脂的影响模型组大鼠血液检测TG、TC、LDL 显著高于空白对照组；与模型组比较，龙生蛭胶囊中、高剂量组可抑制高脂饮食所致的TG、TC、LDL的升高，同时结果显示可以提高抗动脉粥样硬化的胆固醇HDL的含量，实验结果有统计学差异(P<0.05)，见表2。

表2　各组大鼠血脂检测结果(mmol/L)

3.4对血液流变学的影响实验结果表明模型组大鼠全血黏度(高、中、低切)、血浆黏度、红细胞聚集显著高于空白对照组；与模型组比较，龙生蛭中、高剂量组可降低造模所致的血流变学的改变。实验结果和模型组比较有很好的显著性(P<0.05)，见表3。

3.5SOD、MDA的影响实验表明，与对照组相比较，模型组大鼠血清SOD活性显著降低，MDA含量明显升高，有显著性差异。与模型组比较，龙生蛭中高剂量组均能显著升高高脂大鼠SOD活性，降低血清MDA含量，差异有统计学意义，结果见表4。

表3　各组大鼠血液流变学指标比较

表4　各组大鼠血清SOD活性和MDA含量的影响

4讨论动脉粥样硬化(AS)是目前常见的一种心脑血管病变，在中医上属于“痰瘀”、“血瘀”范畴,中药在防治AS方面有着独特的效果，引起世人的关注[6-7]。龙生蛭胶囊方中黄芪、水蛭为君药，黄芪补气以治本、水蛭逐瘀以治标，可收标本同治之功。方中以桃仁、红花、赤芍、川芎、当归为臣，此五药皆为活血祛瘀之品，以助水蛭逐瘀通经之力。方中佐以刺五加、桑寄

生取其补肝肾、壮筋骨作用，诸药合用补气活血，逐瘀通络改善心血管疾病的作用。As公认的危险因素为脂质代谢异常，本研究结果显示中高剂量的龙生蛭胶囊可调节脂质代谢，降低高脂大鼠血液中TG、TC、LDL含量，升高抗AS的胆固醇HDL水平[8]。同时有研究报道血脂水平的变化与血液流变学指标异常变化密切相关，而血液流变学指标异常变化也是AS引发心脑血管疾病的早期表现[9]。本实验结果表明龙生蛭胶囊可明显改善高脂大鼠血液黏度指标，保护血管、对抗AS。

动脉粥样硬化斑块形成学说中氧化应激也是重要组成部分[10]。多种因素诱发动脉粥样硬化发生，使得机体细胞内活性氧的产生与抗氧化之间失衡，从而导致组织的损伤诱发了脂质过氧，使得脂质过氧的主要终产物MDA增加，而内皮细胞表面的抗氧化物酶SOD活性降低致As主动脉病变的加重。实验结果表明龙生蛭胶囊可提高自由基清除酶的活性，维护体内自由基稳态与平衡，增加LDL的抗氧化能力，减少脂质过氧化物的产生，发挥预防高脂血症和抗AS的作用。

[1] 梁柱地，曾宪彪，韦贵宁,等.藤茶双氢杨梅素对动脉粥样硬化大鼠血脂代谢及抗氧化作用的影响[J].医药导报,2015,34(6):710-713.

[2] 霍煜，姚天明，梁卓,等.冠心舒通胶囊对动脉粥样硬化大鼠血脂代谢及血流变学指标的影响[J].辽宁中医药大学学报,2011,13(11):248-250.

[3] 付清伟.步长龙生蛭胶囊联合西药治疗缺血性脑卒中随机平行对照研究[J].实用中医内科杂志,2014,28(2):92-94.

[4] 从学,李学军,张学中.丹红注射液合并龙生蛭胶囊治疗脑梗塞临床观察[J].辽宁中医杂志,2011,38(12):2398-2399.

[5] 杨鹏远,芮耀成,焦亚斌.动脉粥样硬化大鼠实验模型的建立[J].第二军医大学学报,2003，24(7):802-804.

[6] 邢连喜,蔺小平,常锋,等.脂糖泰胶囊副主降血脂功能的实验研究[J].陕西中医，2013，34(1):109-110.

[7] 闫曙光,周永学,惠毅,等.通便玉蓉丸治疗非酒精性脂肪肝及高脂血症的实验研究[J].陕西中医，2012,33(1):111-113.

[8] Barter PJ, Ballantyne CM, Carmena R, etal. ApoB versuscholesterol in estimating cardiovascular risk and in guidingtherapy: report of the thirty-person/ten-country panel [J]. JIntern Med, 2006, 259: 247:258.

[9] 高丽霞.血液流变学检测在高脂血症患者治疗和预防中的意义[J].临床医药实践, 2012,21(2):125-127.

[10] 李震霄,邹洪梅.氧化应激促进动脉粥样硬化机制研究进展[J].中国动脉硬化杂志, 2009,17(8):702-709.

(收稿2016-05-15；修回2016-06-12)

*陕西省教育厅科研计划项目资助(15JK2089)

△陕西步长制药有限公司科研部(西安 710075)

▲陕西省中医药研究院(西安 710003)

R543.1

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2016.09.067